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兔视网膜muller细胞

兔视网膜muller细胞

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产品概述 product description

兔视网膜Muller细胞分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处最多。第二层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力最强。视网膜Muller细胞作为视网膜中的主要胶质细胞,大约占视网膜胶质细胞的90%,因而在视网膜疾病中起着何种作用也受到越来越多的关注。在超微结构水平上,Muller细胞的胞质似乎比临近的其他细胞更高的电子密度,更发达的内质网,细胞核是典型的卵圆形或多角形。但在不同物种中或同一物种中的不同部位,Muller细胞形态也会有所差异的。视网膜Muller细胞是一种特化的神经胶质细胞,不仅具有维持视网膜的正常结构和功能的作用,并调制视网膜神经元活动,还能参与多种病理过程,尤其是眼底增殖性病变,如增生性玻璃体视网膜病变、增生性糖尿病视网膜病变等,体外培养Muller细胞是研究这些增殖性病变途径之一。

产品属性

产品名称 兔视网膜Muller细胞

组织来源 视网膜组织

默认种属 新西兰大白兔,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基:  兔视网膜Muller细胞完全培养基(基础培养基,含FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 梭形、多角形

传代比例: 1:2

传代特性: 可传2-3代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

兔视网膜Muller细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的兔视网膜Muller细胞经GS免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的兔视网膜Muller细胞采用胶原酶消化法和胰蛋白酶反复消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

倒置显微镜检视兔视网膜 muller 细胞,汇合 75‑80% 进行传代,细胞形态完整,无微生物污染,吸除瓶内旧培养基。

无菌 PBS 缓冲液漂洗细胞贴壁层 2 次,缓慢摇晃培养瓶去除代谢碎片,漂洗结束彻底吸净 PBS 缓冲液。

预热胰酶消化液加入瓶内覆盖细胞,37℃5% CO₂培养箱消化 3‑4min,镜下细胞收缩变圆,马上终止消化,muller 细胞对消化较为敏感。

加入视网膜 Müller 细胞完全培养基中和胰酶,轻柔吹打瓶壁,将细胞吹落,制备细胞悬液,降低机械剪切损伤。

细胞悬液转入无菌离心管,1000r/min 离心 5min,离心完成,小心吸弃上清废液,留存管底细胞沉淀。

Müller 细胞专用完全培养基重悬细胞沉淀,充分混匀,细胞计数,接种新的无菌培养容器。

平缓摇动培养瓶使细胞均匀分布,放置 37℃、5% CO₂培养箱,24h 观察贴壁状态,每 2‑3 天更换培养基。