兔食管平滑肌细胞分离自食管组织；食管可分为颈段、胸段和腹段，脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，肌层上1/3段为骨骼肌，下1/3为平滑肌，中段为骨骼肌和平滑肌混合组成。其中，肌纤维的排列方式分为内环形和外纵形两层。食管的蠕动是由食管平滑肌收缩严格控制，食管还有括约肌，位于环状软骨水平的，称为食管上括约肌；位于食管下端，一部分在膈上，穿过膈孔，另一部分在膈下的高压带，称为食管下括约肌。食管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性
产品名称 兔食管平滑肌细胞
组织来源 食管组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔食管平滑肌细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔食管平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔食管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔食管平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
显微镜观察兔食管平滑肌细胞，汇合度 80%‑85% 开展传代，长梭形细胞形态完整，无污染，吸除瓶内旧培养基。
无菌 PBS 缓冲液漂洗贴壁细胞 2 次，轻晃培养瓶洗去残留血清和细胞碎片，漂洗完毕彻底吸除 PBS 液体。
预热胰酶‑EDTA 消化液铺满细胞贴壁层，37℃5% CO₂培养箱消化 3‑5min，镜检细胞收缩变圆，细胞间隙增大，立刻终止消化。
加入含血清完全培养基中和胰酶，沿瓶壁温和吹打，使食管平滑肌细胞脱落，制备均匀细胞悬液。
细胞悬液转移无菌离心管，1000r/min 离心 5min，离心结束，小心吸弃上清废液，保护底部细胞沉淀。
平滑肌细胞完全培养基重悬细胞沉淀，混匀后计数，按实验需要密度接种新培养瓶。
水平轻摇培养瓶让细胞均匀铺展，置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，24h 观察贴壁，每 2‑3d 更换培养基。
