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兔肾脏巨噬细胞

兔肾脏巨噬细胞

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产品概述 product description

兔肾脏巨噬细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫细胞,令其对病原体作出反应。

产品属性

产品名称 兔肾脏巨噬细胞

组织来源 肾组织

默认种属 新西兰大白兔,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基:  兔肾脏巨噬细胞完全培养基(基础培养基,含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 巨噬细胞样

传代比例: 不传代

传代特性: 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群

消化液: 利多卡因(12 mM)

兔肾脏巨噬细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的兔肾脏巨噬细胞经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的兔肾脏巨噬细胞采用酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

倒置显微镜观察兔肾脏巨噬细胞,细胞汇合 75‑80% 进行传代,细胞无异常活化、无微生物污染,吸除瓶内旧培养基。

无菌 PBS 缓冲液加入培养瓶洗涤贴壁细胞 2 次,缓慢摇晃容器洗去漂浮碎片,洗涤结束彻底吸净 PBS。

加入预热胰酶‑EDTA 消化液浸润细胞层,37℃5% CO₂培养箱消化 3‑5min,镜下细胞脱离瓶壁、形态变圆,立即终止消化。

添加含血清完全培养基中和胰酶活性,轻柔吹打瓶壁,收集巨噬细胞制备细胞悬液,操作尽量减少刺激,防止细胞激活。

全部细胞悬液转入无菌离心管,1000r/min 离心 5min,离心完成,小心吸弃上清废液,留存细胞沉淀。

巨噬细胞专用完全培养基重悬沉淀,充分混匀,细胞计数,按照实验密度接种新培养器皿。

平缓晃动培养瓶分散细胞,放置 37℃、5% CO₂培养箱,24h 观察贴壁状态,每 2‑3 天更换培养基。