兔肾动脉平滑肌细胞分离自肾动脉组织;肾动脉的分支为叶间动脉,穿行于肾柱内,上行至皮质与髓质交界处,形成与肾表面平行的弓状动脉。小叶间动脉向被膜发出毛细血管,并向周围的肾小体发出入球小动脉,进入肾小囊后形成球形的毛细血管网,再汇集成出球小动脉,出肾小体。直小动脉分支形成毛细血管网,再汇合成直小静脉,入弓状静脉、叶间静脉,最后汇合成肾静脉经肾门出肾,注入下腔静脉。肾动脉既是肾的营养血管,又是肾的机能血管,与肾泌尿机能密切相关。肾动脉在肾实质内形成两个毛细血管网:肾小球毛细血管网,血压较高,利于血浆滤过形成原尿;球后毛细血管网,血压较低,利于肾小管的重吸收。肾动脉平滑肌细胞是肾动脉的重要结构细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。肾动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性
产品名称 兔肾动脉平滑肌细胞
组织来源 肾动脉组织
默认种属 新西兰大白兔,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 兔肾动脉平滑肌细胞完全培养基(基础培养基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
兔肾动脉平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔肾动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔肾动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
显微镜观察兔肾动脉平滑肌细胞,细胞汇合 80% 左右进行传代,长梭形细胞形态完好,无污染,吸弃瓶内旧培养基。
无菌 PBS 缓冲液加入培养瓶洗涤贴壁细胞 2 次,轻晃容器洗去残留血清、细胞碎片,洗涤结束吸净全部 PBS。
加入预热胰酶‑EDTA 消化液铺满细胞层,37℃5% CO₂培养箱消化 3‑5min,镜检细胞收缩变圆,即刻终止消化。
添加含血清完全培养基中和胰酶活性,轻柔吹打瓶壁,使平滑肌细胞脱落,制备细胞悬液。
细胞悬液转移无菌离心管,1000r/min 离心 5min,离心完毕,小心吸除上清废液,留存管底细胞沉淀。
平滑肌细胞完全培养基重悬细胞沉淀,混匀后计数,按实验密度接种新培养瓶。
平缓摇动培养瓶分散细胞,置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱,24h 观察贴壁伸展,每 2‑3 天更换培养基。
