兔乳腺上皮细胞分离自乳腺组织;乳腺是复管泡状皮肤腺,主要由腺上皮细胞组成,并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期,导管末梢发育成腺泡;近年来的许多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的发生都与乳腺上皮细胞(MEC)有密切联系,体外分离培养MECs即成为研究开展的关键步骤。乳腺是乳房的腺体组织,乳腺由导管和腺泡组成,腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常发育是由体内激素和局部合成的生长因子共同调控,其中乳腺表达的生长因子对乳腺上皮细胞的增殖、分化、凋亡产生极大的影响。乳腺上皮细胞分离自分娩后3-5天的乳腺组织,为贴壁生长型细胞,呈多角形、圆形以及短梭形;乳腺上皮细胞主要功能即生乳功能。
产品属性
产品名称 兔乳腺上皮细胞
组织来源 乳腺组织
默认种属 新西兰大白兔,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 兔乳腺上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
兔乳腺上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔乳腺上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔乳腺上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
显微镜检查兔乳腺上皮细胞,细胞汇合 80% 左右开展传代,观察上皮鹅卵石样形态,排除细菌真菌污染,吸弃旧培养基。
无菌 PBS 缓冲液加入培养瓶漂洗细胞层 2 次,轻晃培养瓶洗去代谢物,漂洗后彻底吸除 PBS 液体。
加入预热胰酶消化液覆盖细胞,置于 37℃CO₂培养箱消化 2‑4min,镜下细胞变圆、细胞簇散开,立刻终止消化。
加入含血清完全培养基中和胰酶活性,温和吹打瓶壁,将上皮细胞吹落,尽量减少吹打气泡,防止上皮细胞损伤。
细胞悬液转移无菌离心管,1000r/min 离心 5min,离心完成,小心去除上清废液,保留细胞沉淀。
使用乳腺上皮细胞完全培养基重悬沉淀,混匀后计数,调整合适细胞密度接种新培养容器。
水平晃动培养瓶使细胞均匀分布,放入 37℃、5% CO₂培养箱,24h 观察贴壁,每 2‑3 天更换培养基,上皮细胞不要过度消化。
