兔乳腺成纤维细胞分离自乳腺组织；乳腺位于皮下浅筋膜的浅层与深层之间，浅筋膜伸向乳腺组织内形成条索状的小叶间隔，一端连于胸肌筋膜，另一端连于皮肤，将乳腺腺体固定在胸部的皮下组织之中。乳腺是哺乳动物少数可以重复经历生长、功能分化和退化过程的器官之一。纤维结缔组织伸入乳腺组织之间，形成许多间隔，这些纤维结缔组织对乳房起固定作用，而纤维结缔组织是由成纤维细胞构成的。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的乳腺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
产品属性
产品名称 兔乳腺成纤维细胞
组织来源 乳腺组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔乳腺成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔乳腺成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔乳腺成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔乳腺成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
倒置显微镜观察兔乳腺成纤维细胞，汇合度到达 80%‑85% 进行传代，确认细胞无污染，梭形形态完好，吸除瓶内旧培养基。
无菌 PBS 缓冲液加入培养瓶，轻柔洗涤贴壁细胞 2 次，晃动瓶子清除残留血清和漂浮碎片，洗涤结束完全吸除 PBS 废液。
加入预热胰酶‑EDTA 消化液浸润全部细胞层，37℃5% CO₂培养箱消化 3‑5min，镜检细胞皱缩变圆，即刻终止消化。
添加含胎牛血清的完全培养基中和胰酶，沿瓶壁分次吹打贴壁部位，使乳腺成纤维细胞脱落，制备均匀细胞悬液。
将全部细胞悬液转入无菌离心管，1000r/min 离心 5min，离心结束，缓慢吸弃上清，留存底部细胞沉淀。
加入预热完全培养基重悬细胞沉淀，充分混匀后细胞计数，按照实验需要的密度接种于新培养瓶。
平缓晃动培养瓶让细胞分散均匀，放置 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，24h 查看贴壁情况，每 2‑3 天更换新鲜培养基。
