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兔前列腺平滑肌细胞

兔前列腺平滑肌细胞

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产品概述 product description

兔前列腺平滑肌细胞分离自前列腺组织;前列腺(Prostate)是雄性特有的性腺器官;前列腺是不成对的实质性器宫,由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子,底朝上,与膀胱相贴,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面贴耻骨联合,后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过,扼守着尿道上口,所以,前列腺有问题时,排尿首先受影响。前列腺是机体非常少有的,具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。作为外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是构成精液主要成分;作为内分泌腺,前列腺分泌的激素称为“前列腺素”。前列腺平滑肌细胞是前列腺的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。前列腺平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。

产品属性

产品名称 兔前列腺平滑肌细胞

组织来源 前列腺

默认种属 新西兰大白兔,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基:  兔前列腺平滑肌细胞完全培养基(基础培养基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 成纤维细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传3代左右

消化液: 0.25%胰蛋白酶

兔前列腺平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的兔前列腺平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的兔前列腺平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

倒置显微镜检视兔前列腺平滑肌细胞,细胞汇合度 80% 左右进行传代处理,排查细胞污染、细胞肥大老化现象,吸走瓶内旧培养基。

倒入无菌 PBS 缓冲液清洗细胞贴壁层 2 次,轻轻晃动培养瓶,去除代谢废物以及残留血清,洗涤之后彻底吸除 PBS。

加入预热胰酶‑EDTA 消化液覆盖细胞,置于 37℃CO₂培养箱消化 3‑6min,镜下细胞收缩变圆、细胞间分离,立刻终止消化反应。

添加足量含血清完全培养基中和胰酶活性,使用移液管温和吹打瓶壁,将长梭形平滑肌细胞剥离,制备细胞悬液,严禁暴力吹打破坏细胞膜。

将细胞悬液转移无菌离心管,1000r/min 离心 5min,离心结束,小心吸取丢弃上清液,保护底部细胞沉淀不被吸走。

加入预热完全培养基重悬细胞沉淀,充分混匀,完成细胞计数,按照实验所需密度接种至新培养瓶或者培养板。

平稳晃动培养瓶使细胞均匀铺展,置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱培养,24h 观察贴壁伸展状态,每 2‑3 天换液,平滑肌细胞不要培养至满汇合。