兔气管上皮细胞分离自气管组织；气管（Trachea），呼吸器官的一部分；为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘，与环状软骨相连；向下至第四、五胸椎体（相当胸骨角平面）交界处，分左、右主支气管，分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成，有弹性，软骨为“C”字形的软骨环，缺口向后，各软骨环以韧带连接起来，环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接，保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜，表面覆盖纤毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒，纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出，以净化吸入的气体。气管上皮是气道与外界环境接触的第一道防线，不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞，还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性，因此，在基础及临床研究中极为重要。
产品属性
产品名称 兔气管上皮细胞
组织来源 气管
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）
培养基： 兔气管上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 上皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔气管上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔气管上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔气管上皮细胞采用链霉蛋白酶-中性蛋白酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
取出细胞培养瓶，置于倒置显微镜下观察细胞汇合度，待细胞达到 80%‑85% 汇合度时进行传代操作，确认细胞形态正常、无杂菌污染，弃去瓶内旧培养基。
加入无菌 PBS 缓冲液轻柔漂洗细胞瓶内壁 2 次，缓慢晃动培养瓶，洗去残留血清代谢产物，漂洗完毕后彻底吸除全部 PBS 液体。
加入预热的胰蛋白酶‑EDTA 消化液，覆盖细胞贴壁层，放入 37℃、5% CO₂培养箱进行消化，计时 2‑4min，显微镜下观察细胞皱缩变圆、细胞间隙散开，立刻终止消化。
加入等量含胎牛血清的完全培养基中和胰酶消化活性，使用无菌移液管缓慢轻柔吹打瓶壁贴壁细胞，反复吹打瓶底各个区域，使细胞充分脱落制备单细胞悬液，避免过度吹打损伤上皮细胞。
将细胞悬液转移至无菌离心管，设置离心参数 1000r/min，离心 5min，离心结束后小心吸弃上层上清液，不要触碰底部细胞沉淀。
加入新鲜预热完全培养基重悬底部细胞沉淀，轻柔吹打混匀，进行细胞计数，按照合适接种密度分装至新的细胞培养瓶 / 培养板中。
将培养瓶放平，轻柔前后左右晃动使细胞分布均匀，放置 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱培养，24h 后观察细胞贴壁状态，后续每 2‑3 天更换新鲜完全培养基。
