兔气管平滑肌细胞分离自气管组织；气管（Trachea），呼吸器官的一部分；为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘，与环状软骨相连；向下至第四、五胸椎体（相当胸骨角平面）交界处，分左、右主支气管，分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成，有弹性，软骨为“C”字形的软骨环，缺口向后，各软骨环以韧带连接起来，环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接，保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜，表面覆盖纤毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒，纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出，以净化吸入的气体。气管平滑肌是气管的重要结构组成之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用；能够保持气道张力，维持气道管状形态，从而有利于气体流通，保持肺部通气。气管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。气管平滑肌细胞的异常是呼吸道疾病的重要病理特征之一，其增生、肥大是气道重塑的关键。
产品属性
产品名称 兔气管平滑肌细胞
简称 TSMCs
组织来源 气管
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔气管平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔气管平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔气管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔气管平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一：无菌术前全面准备 提前30min消杀超净台与实验器具，所有耗材高压灭菌烘干。预热气管平滑肌专用培养基、无菌PBS、0.125%胰酶-胶原酶混合消化液，调试培养箱参数，搭建标准化无菌实验环境。
步骤二：兔气管组织无菌取材纯化 无菌条件下摘取家兔完整气管组织，用无菌PBS冲洗气管内腔，清除黏液与污物，小心剔除气管外壁结缔组织、脂肪、血管及内壁黏膜组织，仅保留气管平滑肌肌层组织，漂洗洁净备用。
步骤三：精细剪切与组织净化 将气管平滑肌组织剪碎至1mm³均匀细小组织块，移入无菌离心管，PBS反复吹打漂洗3次，静置弃上清，彻底清除组织碎屑、血细胞与残留黏液杂质。
步骤四：恒温复合酶解消化 加入4mL预热复合消化液，37℃水浴消化25min，每5min轻柔混匀一次，利用复合酶高效降解气管平滑肌细胞外基质，温和解离细胞，保护细胞活性。
步骤五：终止消化与过滤除杂 消化完成后加入完全培养基终止消化，轻柔吹打释放细胞。100目细胞筛过滤混合液，截留未消化组织残块，收集纯净气管平滑肌细胞悬液。
步骤六：离心富集与均匀重悬 1000r/min室温离心10min，富集细胞沉淀，吸弃上清废液，加入2mL预热专用培养基，轻柔吹打重悬，彻底分散细胞团块。
步骤七：接种与稳态培养管护 细胞悬液接种至培养瓶，补足培养基摇匀，放入37℃、5%CO₂培养箱静置培养。24h贴壁稳定，每48h更换新鲜培养基，观察平滑肌细胞梭形生长与增殖状态。
