兔脐静脉平滑肌细胞分离自脐带组织；它是脐静脉的重要结构组成细胞之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构，脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉，卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中，子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管，与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近，在此处母体和胎儿的血液间进行CO₂和O₂，代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘，脐静脉将O₂和营养物质从胎盘运送给胎儿。血管平滑肌是许多重大血管疾病的细胞基础；血管平滑肌细胞的异常增加的生长潜力在血管疾病发生过程中起决定作用。由于脐带是分娩过程中的废弃物，同时从脐带中分离人脐静脉平滑肌细胞方法相对成熟，使得体外培养的脐静脉平滑肌细胞作为研究血管的模型细胞。脐静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性
产品名称 兔脐静脉平滑肌细胞
组织来源 脐带组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔脐静脉平滑肌细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔脐静脉平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔脐静脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔脐静脉平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一：无菌实验体系搭建实验前完成所有设备、台面、耗材的无菌消杀与烘干处理，预热脐静脉平滑肌专用培养基、无菌PBS、0.125%胰酶消化液，校准培养箱温湿度与气体浓度，保障实验全程无菌稳定。
步骤二：脐静脉平滑肌组织纯化取材 无菌分离兔脐静脉血管，小心剔除血管内膜、外膜所有杂质组织，仅保留血管中膜平滑肌组织，预冷PBS反复漂洗，去除血污、碎屑与残留杂质，获得纯净靶组织。
步骤三：组织剪切与杂质清除 将纯化后的平滑肌组织均匀剪碎至1mm³组织块，移入离心管，PBS反复漂洗3次，静置弃除上清，彻底清除组织间隙残留血细胞与破碎细胞。
步骤四：恒温精准酶解消化 加入预热胰酶消化液，37℃水浴恒温消化23min，每5min颠倒混匀一次，充分降解细胞间基质，实现平滑肌细胞高效解离，保证细胞活性与收获量。
步骤五：终止消化与过滤纯化 消化结束后加入完全培养基终止反应，轻柔吹打释放解离细胞。100目细胞筛过滤混合液，去除组织残块，收集纯净脐静脉平滑肌细胞悬液。
步骤六：离心富集与细胞重悬 1000r/min离心10min，富集管底细胞沉淀，吸弃上清废液，加入2mL预热专用培养基，轻柔吹打重悬，制备均匀单细胞悬液。
步骤七：接种培养与日常观测 细胞悬液接种至培养瓶，补足培养基摇匀，置于37℃、5%CO₂培养箱静置培养。24h贴壁后正常生长，每48h换液一次，定期观察细胞增殖与形态变化。
