兔皮层神经元细胞分离自脑皮层组织；皮层神经元细胞是构成中枢神经系统结构和功能的基本单位。神经元是具有长突触（轴突）的细胞，它由细胞体和细胞突起构成。在长的轴突上套有一层鞘，组成神经纤维，它的末端的细小分支叫做神经末梢。细胞体位于脑、脊髓和神经节中，细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。细胞体是细胞含核的部分，其形状大小有很大差别，直径约4-120微米。核大而圆，位于细胞中央，染色质少，核仁明显。细胞质内有斑块状的核外染色质，还有许多神经元纤维。细胞突起是由细胞体延伸出来的细长部分，又可分为树突和轴突。每个神经元可以有一或多个树突，可以接受刺激并将兴奋传入细胞体。每个神经元只有一个轴突，可以把兴奋从胞体传送到另一个神经元或其他组织，如肌肉或腺体。皮质神经元是大脑皮质的主要组成细胞之一，是大脑进行功能活动调节的基本单位，参与动物多种中枢神经系统疾病的病理过程。通过形态学观察显示神经元从贴壁、伸出突起开始；突起逐渐增多，而后突起进一步增多并逐渐成网，同时细胞胞体增大，周边光晕明显。10-12 d细胞最为丰满，随后神经元开始裂解，突起逐渐减少，细胞已退化变性，轮廓模糊，光晕消失，细胞变形。
产品属性
产品名称 兔皮层神经元细胞
组织来源 脑组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 兔皮层神经元细胞完全培养基(基础培养基，含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 神经元细胞样
传代比例： 不传代
传代特性： 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液： 0.125%胰蛋白酶
兔皮层神经元细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔皮层神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔皮层神经元细胞采用胰蛋白酶消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
步骤一：神经元专属无菌预处理 神经元细胞无增殖能力、极易损伤，实验前深度消杀超净台，所有耗材无热源、无菌处理。提前预热神经元专用培养基、无菌PBS、0.125%胰酶温和消化液，提前包被多聚赖氨酸培养瓶，严格把控低温、无菌、无损伤操作环境。
步骤二：兔大脑皮层神经组织取材 无菌快速摘取新生兔大脑组织，置于预冷PBS中，在体视显微镜下精准剥离大脑皮层灰质神经组织，剔除白质、血管、脑膜及结缔组织，最大程度纯化神经元组织，全程低温快速操作，保护神经元活性。
步骤三：超精细剪切与温和净化 将皮层神经组织轻柔剪碎至0.5mm³超细组织块，避免机械剪切损伤神经细胞。移入离心管，预冷PBS温和漂洗3次，静置弃上清，清除血污与组织碎屑，保留纯净神经组织。
步骤四：低温温和酶解消化 加入预热温和胰酶消化液，37℃水浴避光轻柔消化15min，禁止过度消化，每3min轻微混匀一次，温和解离神经元细胞，最大程度保护神经细胞结构与活性。
步骤五：终止消化与精细过滤 立即加入神经元专用培养基终止消化，极轻柔吹打释放解离神经元。采用200目无菌细胞筛过滤，去除组织残块，收集纯净的神经元单细胞悬液，杜绝杂质污染。
步骤六：低速离心与轻柔重悬 800r/min低速离心8min，低力度富集细胞，避免神经元破损。吸弃上清后加入1.5mL专用培养基，极轻柔吹打重悬，不产生气泡，保留神经元完整活性。
步骤七：低密度接种与静置培养 将神经元悬液低密度接种至多聚赖氨酸包被的培养瓶，补足培养基后静置，放入37℃、5%CO₂培养箱，72h绝对静置禁止移动，待神经元贴壁、伸出突触后，每3天半量更换新鲜培养基，观察神经突触生长状态。
