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兔脉络膜血管内皮细胞

兔脉络膜血管内皮细胞

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产品概述 product description

兔脉络膜血管内皮细胞分离自眼球脉络膜组织;脉络膜在视网膜和巩膜之间,含有丰富血管和色素细胞,对外力冲击的耐受性较视网膜差,当眼球受到从前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时,坚硬的巩膜在其外面又有抵抗作用,使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血。脉络膜呈暗褐色,围绕视神经乳头部有照膜,为青绿色带金属光泽的三角形区。脉络膜是眼球中膜的后2/3处的薄膜,由纤维组织、小血管和毛细血管组成,软而薄,棕红色,在巩膜和视网膜之间,续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层,其含有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同时对视觉系统起保护作用,对整个视觉神经有调节作用。续连于睫状体后方,含丰富的血管和色素细胞,有营养和遮光作用。

产品属性

产品名称 兔脉络膜血管内皮细胞

简称 CVECs

组织来源 脉络膜组织

默认种属 新西兰大白兔,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)

培养基: 兔脉络膜血管细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 内皮细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传2-3代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

兔脉络膜血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的兔脉络膜血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的兔脉络膜血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

细胞复苏解冻:取出冻存管,37℃水浴快速融化冻存细胞,轻微晃动冻存管,少量冰晶残留,酒精消毒管壁,超净台把细胞悬液转移至预热血管内皮完全培养基离心管。

离心去除 DMSO 冻存液:配平离心管,1000rpm 离心 5min,轻柔吸弃上清液体,不要触碰底部脆弱内皮细胞沉淀。

重悬分散细胞沉淀:加入 2‑3mL 兔脉络膜血管内皮细胞完全培养基,柔和吹打沉淀,打散细胞聚团,禁止剧烈吹打。

计数接种培养瓶:细胞计数,接种密度 6×10⁴‑1.2×10⁵cells/cm²,补足完全培养基,十字摇晃培养瓶,细胞均匀铺底。

恒温孵育贴壁:置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置孵育,24‑48h 减少挪动培养器皿。

换液监测细胞形态:复苏 24h 后显微镜观察贴壁,弃旧培养基,更换新鲜预热内皮完全培养基,每 2‑3 天换液。

传代扩增培养:细胞汇合 80%‑85%,PBS 洗涤细胞层,低浓度胰酶消化,镜下细胞回缩变圆立刻终止消化,收集细胞悬液离心,分瓶传代,严控传代次数。