兔甲状腺滤泡上皮细胞分离自甲状腺组织;甲状腺是脊椎动物非常重要的腺体,属于内分泌器官。在哺乳动物身体中,它位于颈部甲状软骨下方,气管两旁。甲状腺表面有结缔组织被膜,表面结缔组织深入到腺实质,将实质分为许多不明显的小叶,小叶内有很多甲状腺滤泡和滤泡旁细胞。甲状腺控制使用能量的速度、制造蛋白质、调节机体对其他贺尔蒙的敏感性。甲状腺依靠制造甲状腺素来调整这些反应,有T3和T4。这两者调控代谢、生长速率还有调解其他的身体系统。T3和T4由碘和酪胺酸合成。甲状腺也生产降钙素,调节体内钙的平衡。其中,甲状腺滤泡上皮细胞(也称为滤泡细胞或主要细胞)是在甲状腺细胞是负责生产和分泌甲状腺激素,甲状腺素(T4)和三碘甲状腺原氨酸(T3)。
产品属性
产品名称 兔甲状腺滤泡上皮细胞
组织来源 甲状腺组织
默认种属 新西兰大白兔,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 兔甲状腺滤泡上皮细胞完全培养基(基础培养基,含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
兔甲状腺滤泡上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔甲状腺滤泡上皮细胞经TG(甲状腺球蛋白)免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔甲状腺滤泡上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
冻存细胞复苏:取出冻存管,37℃水浴快速融化,轻微摇晃,冰晶基本消融,75% 酒精消毒管壁,超净台将细胞悬液转移至预热完全培养基的 15mL 离心管。
离心去除冻存保护剂:配平离心管,1000rpm 离心 5min,小心吸走上清液,留存底部细胞沉淀。
重悬分散细胞沉淀:加入 2‑3mL 兔甲状腺滤泡上皮细胞专用完全培养基,轻柔吹打沉淀,打散细胞团块,制备均匀细胞悬液。
细胞计数接种:计数细胞,接种密度 6×10⁴‑1.2×10⁵cells/cm²,补加足量完全培养基,十字摇晃培养瓶,让上皮细胞均匀铺于瓶底。
培养箱静置孵育:置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置孵育,24h 之内尽量不移动培养容器,方便上皮细胞贴壁。
换液观察细胞形态:复苏 24h 镜检贴壁,弃旧培养基,更换新鲜预热完全培养基,去除悬浮死亡细胞,每 2‑3 天换液,观察上皮鹅卵石样形态。
传代扩增培养:细胞汇合 80%‑85%,PBS 洗涤细胞层,胰酶消化,镜下细胞回缩变圆,立刻加入完全培养基终止消化,收集细胞悬液离心,分瓶传代扩增。
