兔脊髓神经元细胞分离自脊髓组织；脊髓是细细的管束状的神经结构，位于脊柱的椎管内且被脊椎保护；是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分，在椎管里面，上端连接延髓，两旁发出成对的神经，分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形（蝴蝶型）灰质区，主要由神经细胞构成；在灰质区周围为白质区，主要由有髓神经纤维组成；脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经（称为脊神经）分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路，也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节，31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。神经系统最基本的结构和功能单位是神经元，即神经细胞，其大小和外观在中枢神经系统中差异很大。但都具有胞体和树突、轴突。胞体又叫核周体，内含神经丝、微管、内质网、游离核糖体和一个有明显核仁的核。一些大神经元突起的粗面内质网可用Nissl染色显示，在光镜下是灰蓝色斑块状，称为尼氏小体。树突和轴突是神经元的突起，能在神经元之间传递电冲动，突起的大小和形态各不相同，很难用常规的显微镜鉴别。脊髓组织内含有大量胶质细胞，神经元含量少，分离纯化难度大，且脊髓神经元细胞是高度分化的终末细胞，不能分裂增殖，培养要求高。刚接种的脊髓神经元呈圆形，体积小，透亮，无突起。培养2-3 d，可见胞体增大，突起增多延长；培养6-7 d，细胞体大饱满，突起明显增加延长并交织成网，光晕明显，立体感强。培养20 d后，死亡细胞明显增加，细胞出现内空泡，突起粗细不均，甚至脱壁，发生细胞崩解。
产品属性
产品名称 兔脊髓神经元细胞
组织来源 脊髓组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 兔脊髓神经元细胞完全培养基(含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 神经元细胞样
传代比例： 不传代
传代特性： 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液： 0.125%胰蛋白酶
兔脊髓神经元细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔脊髓神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔脊髓神经元细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
细胞温和复苏：取出兔脊髓神经元冻存管，37℃水浴快速轻晃融化，少量冰晶即可，酒精消毒管壁，超净台中将细胞悬液缓慢滴入预温神经元专用完全培养基离心管，神经元细胞脆弱，全程操作动作放缓。
低速离心去除冻存液：配平离心管，800rpm 离心 6min，降低离心转速，减少神经元损伤，离心结束轻柔吸弃上清，切勿扰动细胞沉淀。
温和重悬细胞沉淀：加入 2mL 兔脊髓神经元专用完全培养基，使用大口径枪头缓慢吹打 3‑6 次，仅打散沉淀，禁止剧烈吹打，避免神经元胞体破损。
计数接种包被培养板：提前用多聚‑L‑赖氨酸包被培养瓶 / 板，计数细胞，接种密度 8×10⁴‑1.5×10⁵cells/cm²，补加神经元培养基，缓慢十字晃动，严禁剧烈震荡。
培养箱静置孵育：放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置，48h 内不要挪动培养板，给予神经元充分时间贴壁、伸出突触。
半量换液维持培养：复苏 48h 之后执行半量换液，只吸出一半旧培养基，补入同等体积新鲜预热神经元完全培养基，不全部弃除旧培养液，保护神经元微环境，每 2‑3 天半量换液。
细胞状态监测维护：倒置显微镜每日观察神经元突触生长、胞体形态，该细胞不适合传代培养；若开展药物处理实验，直接使用原代培养神经元，避免胰酶消化损伤神经元。
