兔角膜基质细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜基质层是角膜的主要组成部分，占据角膜厚度的90%，由角膜基质细胞、胶原纤维和细胞外基质构成。角膜基质层缺损的修复主要由角膜基质细胞的增殖及分泌细胞外基质完成。角膜基质层具有结构规整，透明度高的特点，正常情况下角膜基质细胞分泌组成基质层的成分，维持角膜的透明度，此细胞对于角膜损伤的修复具有重要意义。角膜基质细胞，存在于角膜基质层中，在正常情况下，处于静止状态。但当角膜损伤时，不同上皮来源的因子及环境信号，将影响角膜基质细胞的应答反应，决定着角膜能否完全被修复。
产品属性
产品名称 兔角膜基质细胞
组织来源 角膜组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔角膜基质细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔角膜基质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔角膜基质细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔角膜基质细胞采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
冻存细胞复苏操作：取出冻存管，37℃水浴快速融解，轻摇冻存管，仅剩少量冰晶，酒精消毒管壁，超净台中将细胞悬液转移至预加完全培养基的离心管。
离心去除 DMSO 保护剂：配平离心管，1000rpm 离心 5min，小心吸除上清液体，不触碰底部细胞沉淀。
重悬制备细胞悬液：加入 2‑3mL 兔角膜基质细胞专用完全培养基，柔和吹打细胞沉淀，打散细胞聚团，减少机械损伤。
细胞计数接种：计数细胞浓度，接种密度 5×10⁴‑1×10⁵cells/cm²，补足培养基，十字晃动培养瓶，使细胞均匀铺底。
培养箱静置孵育：置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置，24h 不挪动培养器皿，保障细胞贴壁。
换液监测细胞状态：复苏 24h 镜检贴壁，弃旧培养基，更换新鲜预热完全培养基，去除悬浮死细胞，每 2‑3 天换液。
传代扩增：细胞汇合 80%‑85%，PBS 洗涤，胰酶消化，镜下细胞变圆回缩，加入完全培养基终止消化，收集细胞悬液离心，分瓶传代。
