兔肌源性干细胞分离自肌肉组织；肌源性干细胞（MDSCs）属于成体多能干细胞，具有多细胞系分化和自我更新能力。通过诱导刺激，MDSCs可以分化为脂肪、骨骼、软骨、平滑肌和神经细胞等多种细胞和组织类型；作为基因治疗和组织工程的供体细胞，已成为治疗心肌梗死、Duchenne氏肌营养不良等疾病的研究热点；近年来，肌源性干细胞在治疗尿失禁等方面的应用逐步得到重视。需注意的是，肌源性干细胞主要存在于骨骼肌组织中，只是成熟组织的很少部分细胞；平时处于静止状态，在细胞应激和组织缺失时才会激活；并且随着年龄的增加，所含细胞数量逐渐减少，而目前临床疾病的治疗主要是针对成体进行。肌源性干细胞的体外扩增对细胞移植和干细胞介导的基因治疗至关重要。对肌源性干细胞的扩增研究发现，EGF、FGF-2和SCF可以通过减数分裂或促使不分裂细胞进入有丝分裂周期，从而刺激细胞增生。更重要的是，细胞因子诱导的体外扩增可以通过自我更新不刺激细胞分化，从而保持干细胞表型。
产品属性
产品名称 兔肌源性干细胞
简称 MSC
组织来源 骨骼肌组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 兔肌源性干细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔肌源性干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔肌源性干细胞经Sca-1免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔肌源性干细胞采用胶原酶-中性蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法结合密度梯度离心、差速贴壁法，最后通过肌源性干细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
冻存管快速复苏：37℃水浴融化冻存细胞，轻微晃动冻存管，冰晶基本消融，75% 乙醇消毒管壁，移入超净台，将细胞悬液转移至预加完全培养基的离心管。
离心处理去除 DMSO：配平离心管，1000rpm 离心 5min，离心完毕，缓慢吸除全部上清，肌源性干细胞沉淀松散，枪头抬高，不要触碰管底。
重悬制备细胞悬液：加入 2‑3mL 兔肌源性干细胞完全培养基，柔和吹打沉淀，打散细胞聚团，控制吹打力度，减少干细胞机械损伤。
细胞计数与接种：计数细胞浓度，接种密度 5×10⁴‑1×10⁵cells/cm²，转移至培养瓶补全培养基，十字法摇匀细胞，保证细胞分散均匀。
培养箱静置孵育：置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置孵育，24h 之内尽量不移动培养容器，方便干细胞贴壁生长。
换液观察细胞形态：复苏 24h 后倒置显微镜观察贴壁状态，弃旧培养基，更换预热新鲜完全培养基，清除悬浮死亡细胞，每 2‑3 天换液，留意细胞分化迹象。
传代扩增维护细胞特性：细胞汇合 75%‑80% 开展传代，PBS 洗涤细胞，低浓度胰酶消化，细胞回缩变圆立刻加培养基终止消化，收集细胞离心，分瓶传代，避免细胞过度融合诱导分化。
