兔肌腱成纤维细胞分离自肌腱组织；肌腱是肌腹两端的索状或膜状致密结缔组织，便于肌肉附着和固定。一块肌肉的肌腱分附在两块或两块以上的不同骨上，是由于肌腱的牵引作用才能使肌肉的收缩带动不同骨的运动。每一块骨骼肌都分成肌腹和肌腱两部分，肌腹由肌纤维构成，色红质软，有收缩能力，肌腱由致密结缔组织构成，色乳白较硬，没有收缩能力。肌腱把骨骼肌附着于骨骼。长肌的肌腱多呈圆索状，阔肌的肌腱阔而薄，呈膜状，又叫腱膜。此处的肌腹即为通常所说的红肌，而肌腱即为白肌，分别控制肌肉的力量、爆发力和耐力。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
产品属性
产品名称 兔肌腱成纤维细胞
组织来源 肌腱组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔肌腱成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3-5代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔肌腱成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔肌腱成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔肌腱成纤维细胞采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
冻存细胞快速复苏：取出细胞冻存管置于 37℃水浴锅中快速融化，持续晃动冻存管，仅留微小冰晶即可，外壁酒精消毒后转移进超净工作台，把细胞悬液转移至装有 4mL 预热完全培养基的无菌离心管。
离心清除冻存液杂质：配平离心管，1000rpm 离心 5min，离心结束，缓慢移除全部上清液体，动作轻柔，防止吹散底部松散的细胞沉淀。
制备单细胞悬液：添加 2‑3mL 兔肌腱成纤维细胞完全培养基，反复轻柔吹打管底沉淀，充分打散成团细胞，吹打力度适中，防止机械剪切力损伤成纤维细胞。
定量接种细胞：进行血细胞计数板计数，以 6×10⁴‑1.2×10⁵cells/cm² 的密度接种于细胞培养瓶，补足培养基，采用十字摇晃法混匀细胞，杜绝上下剧烈震荡。
恒温静置贴壁培养：放置于 37℃，5% CO₂饱和湿度培养箱静置孵育，初始 24h 避免移动培养瓶，利于成纤维细胞伸展贴附在培养器皿底面。
显微镜监测与换液：24h 后倒置显微镜观察细胞贴壁、伸展形态，弃除旧培养基，PBS 轻洗一次，添加新鲜完全培养基，清除悬浮死细胞，间隔 2‑3 天定期换液。
传代扩增操作：细胞汇合至 80% 左右，PBS 洗涤细胞层，加入胰蛋白酶消化，镜下看到细胞胞体收缩、间隙变大，加入培养基终止消化，吹打收集细胞，离心分瓶传代培养。
