兔滑膜细胞分离自滑膜组织；滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构，各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构，同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎（OA）以关节软骨退行性变为特征，其病理改变累及关节的各个组成部分，但绝不仅局限于软骨，还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响，相互作用，共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的最大细胞群体，是维持关节正常功能的重要组织结构，它包埋在颗粒状无定性的基质中，基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型（巨噬样滑膜细胞）、B型（成纤维样滑膜细胞）以及C型（树突细胞样滑膜细胞）细胞组成。滑膜细胞主要功能：①滑膜细胞产生润滑液成分，并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关；②滑膜细胞增生，表现为不依赖于支持物生长，并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏；③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。
产品属性
产品名称 兔滑膜细胞
组织来源 滑膜组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 兔滑膜细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔滑膜细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔滑膜细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔滑膜细胞采用混合酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
细胞复苏：取出冻存的兔滑膜细胞冻存管，快速投入 37℃水浴，轻柔摇晃 1‑2min 至管内冰晶基本融化，75% 酒精擦拭冻存管外壁消毒后移入超净台，将细胞悬液缓慢滴入含有完全培养基的 15mL 离心管中轻柔混匀。
离心去除冻存保护剂：将离心管配平放入离心机，1000rpm 离心 5min，结束后小心吸弃上层含 DMSO 的上清液，注意不要触碰底部细胞沉淀。
重悬细胞沉淀：向离心管内加入 2‑3mL 预热好的兔滑膜细胞专用完全培养基，使用移液管轻柔吹打细胞沉淀 8‑12 次，使细胞充分分散为单细胞悬液，避免产生大量气泡损伤细胞膜。
细胞接种铺板：吸取部分细胞悬液进行细胞计数，按照推荐接种密度（5×10⁴‑1×10⁵cells/cm²）接种至培养瓶 / 培养板，补加足量完全培养基，轻轻水平十字摇晃培养器皿，让细胞均匀分布于培养底面。
培养箱孵育培养：将培养瓶平稳放入 37℃、5% CO₂饱和湿度细胞培养箱，静置孵育，前 24h 尽量不要挪动培养器皿，给细胞充足时间贴壁。
细胞换液观察：复苏培养 24h 后，显微镜观察细胞贴壁状态，吸弃旧培养基，加入新鲜预热完全培养基，去除未贴壁死亡细胞，后续每 2‑3 天执行一次换液操作。
细胞传代处理：当细胞汇合度达到 80%‑85% 时，吸走培养基，PBS 清洗 2 次，加入胰酶消化液孵育，镜下观察细胞回缩变圆后立刻加入完全培养基终止消化，吹打收集细胞悬液，离心后分瓶继续扩增培养。
