兔滑膜间充质干细胞分离自滑膜组织;滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构,滑膜呈淡红色,平滑闪光,薄而柔润,由疏松结缔组织组成。间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)来源于胚胎时期的中胚层组织,具有很强的自我复制和多向分化潜能,具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞及肌细胞等多种终末细胞定向分化的能力,运用 MSCs来修复软骨损伤具有很好的应用前景,目前已能够从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等组织以及羊水、脐带、脐带血中分离和制备间充质干细胞。
产品属性
产品名称 兔滑膜间充质干细胞
组织来源 滑膜组织
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 兔滑膜间充质干细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传3-5代左右
消化液: 0.25%胰蛋白酶
兔滑膜间充质干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔滑膜间充质干细胞经CD90免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔滑膜间充质干细胞采用混合酶消化法结合有限稀释法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
试剂耗材准备:兔滑膜间充质干细胞完全培养基、PBS 缓冲液、间充质干细胞消化液 37℃水浴复温;T25 培养瓶、离心管、枪头等耗材超净台紫外灭菌,确认干细胞专用添加剂完备。
培养瓶消杀转移:取出细胞培养瓶,75% 酒精擦拭瓶体外壁,移入超净台,缓慢吸弃瓶内旧培养基,枪头避开贴壁干细胞单层,防止刮伤细胞。
PBS 洗涤细胞:加入 3‑4mL 无菌 PBS 缓冲液,轻轻晃动培养瓶,浸润全部细胞生长底面,洗去细胞碎片以及残留血清,彻底吸除 PBS 废液。
细胞消化操作:传代加入消化液室温孵育,显微镜观察细胞回缩变圆,细胞间隙增大,马上加入完全培养基终止消化;单纯换液直接加入新鲜预热培养基。
离心重悬铺瓶:收集全部细胞悬液转移至无菌离心管,1000r/min 离心 5min,丢弃上清,使用完全培养基轻柔吹打细胞沉淀,调整合适细胞密度接种新培养瓶。
培养箱静置孵育:标记细胞类型、操作日期,酒精擦拭瓶外壁,放入 37℃、5% CO₂饱和湿度细胞培养箱,水平放置,减少震动。
干细胞状态监测:24h 显微镜观察贴壁,细胞呈长梭形;每 2‑3 天更换培养基,汇合度 70‑80% 及时传代,避免干细胞过度汇合导致分化,观察污染情况并记录。
