兔骺软骨细胞分离自骨骺生长板;骨骺生长板位于长骨两端骨骺和骨干之间的软骨组织,其中的骺软骨细胞可分裂、成熟、肥大,最终被骨组织所替换,对于长骨生长具有重要作用。幼稚的骺软骨细胞位于软骨组织的表层,单个分布、体积较小、呈椭圆形,长轴与软骨表面平行,越向深层的骺软骨细胞体积之间增大呈圆形,细胞核圆形或卵圆形,染色浅,细胞质弱嗜碱性,常见数量不一的脂滴。成熟的骺软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内,这些骺软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,骺软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,骺软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的骺软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
产品属性
产品名称 兔骺软骨细胞
组织来源 生长板组织
默认种属 新西兰大白兔,其他咨询
默认种属 新西兰大白兔,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 兔骺软骨细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每3-4天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 梭形、多角形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
兔骺软骨细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔骺软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔骺软骨细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化并软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
前期准备工作:兔骺软骨细胞完全培养基、PBS 缓冲液、软骨细胞消化液 37℃水浴复温;T25 培养瓶、离心管、移液耗材超净台紫外灭菌,培养基避免长时间开盖暴露。
培养瓶外壁消杀:取出细胞培养瓶,75% 酒精擦拭瓶身,移入超净台,缓慢吸弃瓶内旧培养基,操作轻柔,保护软骨贴壁细胞层。
PBS 洗涤步骤:加入 3‑4mL 无菌 PBS 缓冲液,缓慢倾斜晃动培养瓶,浸润全部细胞生长底面,洗去细胞碎片与残留血清,吸除全部 PBS 废液。
消化解离细胞:传代加入消化液室温孵育,镜下细胞收缩变圆,马上加入完全培养基终止消化;仅换液操作直接添加预热完全培养基。
离心重悬铺瓶:收集细胞悬液转移至无菌离心管,1000r/min 离心 5min,弃上清,新鲜完全培养基吹打沉淀,调整细胞密度接种新培养容器。
入箱孵育培养:标记细胞信息与操作日期,酒精擦拭瓶外壁,放入 37℃、5% CO₂饱和湿度细胞培养箱,水平静置摆放。
生长监测记录:24h 镜检贴壁,软骨细胞多边形;每 2‑3 天更换培养基,细胞汇合度 75‑80% 传代,观察细胞肥大分化、污染情况并记录。
