兔海绵体内皮细胞分离自海绵体组织；阴茎海绵体是由海绵状的小梁和腔隙构成的血窦结构，它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中，而海绵体内皮细胞则覆盖于海绵体血窦的腔面，仅占海绵体组织的2.8%。在消化海绵体组织时，胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系，破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。如果消化时间延长或胶原酶浓度过大，平滑肌细胞和成纤维细胞也将被消化下来，从而影响海绵体内皮细胞的纯度。因此，比较筛选合适的胶原酶浓度和消化时间是成功分离海绵体内皮细胞的关键。
产品属性
产品名称 兔海绵体内皮细胞
组织来源 海绵体组织
默认种属 新西兰大白兔，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）
培养基： 兔海绵体内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 内皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
兔海绵体内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔海绵体内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔海绵体内皮细胞采用混合酶消化法结合机械分离法、并用内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
实验前期准备：兔海绵体内皮细胞完全培养基、PBS 缓冲液、专用消化液 37℃水浴预热；T25 瓶、离心管、移液耗材超净台紫外灭菌，确认内皮细胞添加生长添加剂。
培养瓶外部消杀：取出细胞培养瓶，75% 酒精擦拭瓶体外壁，移入超净工作台，缓慢吸弃瓶内旧培养基，枪头不要触碰贴壁细胞单层。
PBS 漂洗细胞层：加入 3‑4mL 无菌 PBS 缓冲液，缓慢摇晃培养瓶，充分冲洗细胞底面，洗去代谢废物、悬浮死细胞，完全吸净 PBS 废液。
细胞消化解离：传代时加入消化液室温孵育，显微镜观察细胞回缩变圆，间隙增大，立刻加入完全培养基终止消化；日常换液直接添加新鲜培养基，省略消化步骤。
离心重悬接种：收集全部细胞悬液移入无菌离心管，1000r/min 离心 5min，弃上清，新鲜完全培养基轻柔吹打沉淀，配置合适细胞密度接种新培养容器。
入箱恒温孵育：标记细胞信息、操作时间，酒精擦拭瓶外壁，放置 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，平稳摆放，减少挪动。
日常监测维护：24h 镜检细胞贴壁，观察内皮细胞多边形形态；每 2‑3 天更换培养基，细胞汇合度达到 80% 及时传代，留意污染，做好实验记录。
