兔肺成纤维细胞分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6 h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持肺器官的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
产品属性
产品名称 兔肺成纤维细胞
简称 LF
组织来源 肺组织
默认种属 新西兰大白兔,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25 / 5×10^5Cells/Vial
培养基: 兔肺成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
兔肺成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的兔肺成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的兔肺成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
镜检细胞汇合 80‑85%,吸出旧培养基。
PBS 清洗贴壁成纤维细胞 2 次,吸除 PBS 废液。
0.25% 胰酶‑EDTA 消化液加入瓶内,37℃孵育 3‑4min,细胞回缩。
兔肺成纤维细胞完全培养基终止消化,吹打制备悬液。
悬液移至离心管,1000rpm 离心 5min,弃上清。
肺成纤维专用完全培养基重悬沉淀,分瓶接种。
37℃、5% CO₂培养箱培养,24h 观察贴壁,2‑3 天换液。
