猪脂肪细胞分离自腹部腹股沟皮下白色脂肪；脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成，聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶；贮存的脂肪，在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸，经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应，参与多种重要病理生理过程；脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪细胞分为白色脂肪细胞和褐色（棕色）脂肪细胞，常呈白色，在婴幼儿期大量增殖，到青春期数量达到巅峰，此后数量一般不再增加。细胞内含有大量富含脂肪的小泡，称为脂质泡，富含光面内质网。此外，还有一种褐色脂肪细胞，在动物体内主要存在于肩胛骨间、颈背部、腋窝、纵隔及肾脏周围，含有高度团缩的褐色脂肪，作用是将脂质分解产热，调节体内脂质比例。
产品属性 product attributes
产品名称 猪脂肪细胞
组织来源 腹部腹股沟皮下白色脂肪
默认种属 小香猪，其他咨询
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 猪脂肪细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 梭形、多角形、圆形
传代比例： 不传代
传代特性： 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液： 0.25%胰蛋白酶
猪脂肪细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的猪脂肪细胞经油红O定性检测阳性，成脂染色数占比>60%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的猪脂肪细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法获得前脂肪细胞，经成脂诱导培养基诱导培养制备而来。
操作步骤 operation steps
一、实验前准备
1. 解剖器械、离心管、滤网灭菌；超净台紫外消毒 30min。
2. 试剂：无菌 PBS 双抗液、0.1%Ⅰ 型胶原酶、DMEM 完全培养基、红细胞裂解液。
3. 冰盒放置预冷 PBS，提前分装培养基与消化液。
二、取材与预处理
1. 取猪皮下白色脂肪组织，酒精消毒表层，PBS 反复冲洗去除血迹与污物。
2. 仔细剔除血管、筋膜等非脂肪结缔组织，剪切成 1mm³ 脂肪组织碎块。
三、细胞分离与消化
1. 脂肪碎块按 1:3 比例加入胶原酶消化液，37℃水浴震荡消化 40min。
2. 培养基中和消化，充分吹打混匀，分层静置后吸取下层细胞悬液。
3. 离心 1200rpm 6min，弃上层漂浮脂肪油滴，沉淀裂解红细胞后再次离心洗涤。
四、纯化与接种培养
1. 细胞沉淀重悬过 200 目筛网，去除组织残渣。
2. 按适宜密度接种培养瓶，37℃培养箱培养。
3. 24h 换液除去漂浮脂滴与死细胞，每 2~3d 换液，诱导分化可加入分化诱导液。
