人脐动脉平滑肌细胞分离自脐带组织;它是脐动脉的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构,脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO₂和O₂,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘,脐静脉将O₂和营养物质从胎盘运送给胎儿。由于脐带是分娩过程中的废弃物,同时从脐带中分离脐静动平滑肌细胞方法相对成熟,使得体外培养的脐动脉平滑肌细胞作为研究血管的模型细胞。脐动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性
产品名称 人脐动脉平滑肌细胞
简称 UASMCs
组织来源 脐带组织
默认种属 人,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 人脐动脉平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
人脐动脉平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的人脐动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的人脐动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
血管中层剥离:分离脐动脉血管中层平滑肌组织,彻底去除内膜内皮与外膜结缔组织,保证组织纯度。
剪切细化组织:将平滑肌组织剪成极细碎块,增大酶解接触面积,提升细胞解离效率。
复合酶长时间消化:胶原酶+弹性蛋白酶复合液37℃消化5h,充分解离血管平滑肌细胞。
静置贴壁纯化:过滤接种后静置3h,利用平滑肌细胞慢贴壁特性,去除快速贴壁杂细胞。
低血清养护:采用2%低血清平滑肌培养基培养,抑制细胞异常增殖,维持细胞静息状态。
低比例传代:细胞融合85%传代,1:5低比例分瓶,避免细胞密度过低导致老化。
收缩功能验证:培养稳定后检测细胞收缩应答功能,功能正常即可用于血管相关实验。
