人脐动脉内皮细胞分离自脐带组织;它是脐动脉的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构,脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO₂和O₂,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘,脐静脉将O₂和营养物质从胎盘运送给胎儿。
产品属性
产品名称 人脐动脉内皮细胞
组织来源 脐带组织
默认种属 人,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 人脐动脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: Accutase消化液或0.25%胰蛋白酶
人脐动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的人脐动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的人脐动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
脐动脉血管剥离:无菌分离新鲜脐带中的脐动脉,剔除血管外膜结缔组织,无菌PBS冲洗血管内腔血污。
腔内酶解灌流:向脐动脉管腔内灌入0.25%胰酶,封闭两端,37℃水浴孵育10min,轻柔晃动解离内腔内皮细胞。
腔内细胞收集:收集管内酶液与冲洗液,离心收集内皮细胞沉淀,去除血管平滑肌杂细胞。
内皮专用培养基培养:用动脉内皮细胞专用高营养培养基重悬接种,37℃、5%CO₂稳定培养。
短时换液养护:24h首次换液,后续每日半量换液,适配动脉内皮细胞高代谢特性。
精准消化传代:细胞融合90%传代,严格控制胰酶消化时间≤90s,避免损伤动脉内皮屏障功能。
形态纯度质控:细胞呈鹅卵石样单层排列,无梭形杂细胞污染,纯度达标后扩增冻存。
