人脐带血来源内皮祖细胞分离自脐带血;脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液。近十几年的研究发现,脐带血中含有可以重建造血和免疫系统的造血干细胞,可用于造血干细胞移植;因此,脐带血已成为造血干细胞的重要来源。脐带血中含有大量的干细胞,干细胞是生命的种子,它会分化成机体的各种细胞,结出各种不同的果实——血液细胞、神经细胞、骨骼细胞等。干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体;这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量,又可进一步分化为各种组织细胞,从而在组织修复等方面发挥积极作用。内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞,亦称为成血管细胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞,缺乏成熟内皮细胞的特征性表型,不能形成管腔样结构,其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。研究显示,内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用,并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路,EPCs生物学特性和治疗作用的研究成为这一领域新的热点。
产品属性
产品名称 人脐带血来源内皮祖细胞
简称 UCB-EPCs
组织来源 脐带血
默认种属 人,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 人脐带血来源内皮祖细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代;不建议多次传代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
人脐带血来源内皮祖细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的人脐带血来源内皮祖细胞经CD34免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的人脐带血来源内皮祖细胞采用密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
单核细胞富集:通过密度梯度离心分离脐带血单个核细胞,作为内皮祖细胞初始培养原料。
纤连蛋白包被培养板:培养板提前用纤连蛋白包被,构建内皮细胞特异性贴壁基质,提升祖细胞贴壁率。
定向诱导培养:接种后加入含VEGF诱导因子的内皮祖细胞专用培养基,诱导细胞定向增殖分化。
精准周期换液:接种后第4天首次换液,去除未贴壁杂细胞,后续每2天换液一次。
克隆筛选扩增:培养7天左右出现典型内皮祖细胞克隆,筛选形态规整克隆,单独扩增培养。
功能鉴定检测:检测细胞吞噬能力、小管形成能力,验证内皮祖细胞血管生成功能。
低代冻存留存:3-5代高活性细胞冻存,避免高代细胞功能衰退,保留血管分化活性。
