人破骨细胞分离自腿骨髓组织;破骨细胞是骨组织中的多核巨细胞,位于骨组织表面的浅凹处。目前一般认为破骨细胞是分离自骨骼外的造血系统,其前体可能属于造血干细胞的前单核细胞。破骨细胞的主要功能是维持骨吸收和骨形成的相对平衡,若失去这种平衡则发生病理性变化。因此多数学者从破骨细胞着手研究破骨细胞的结构、功能探讨骨吸收,形成相互平衡的机制。但破骨细胞是一种终末分化细胞,属于不增殖细胞群,不能增殖和传代,只能进行原代培养且存活时间较短。
产品属性
产品名称 人破骨细胞
组织来源 腿骨髓组织
默认种属 人,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 人破骨细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 多核巨细胞
传代比例: 不传代
传代特性: 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液: 0.25%胰蛋白酶
人破骨细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的人破骨细胞经TRAP染色检测,纯度可达30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的人破骨细胞采用机械分离法/密度梯度离心法和骨髓单核细胞诱导法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
单核细胞诱导取材:选取人外周血单核细胞为诱导源,无菌分离单个核细胞,去除红细胞、粒细胞杂质。
基础细胞接种:纯化的单核细胞按2×10⁵个/mL接种,使用含诱导因子的专用基础培养基培养。
定向诱导分化:接种24h后更换含RANKL、M-CSF诱导因子的完全培养基,启动单核细胞向破骨细胞定向分化。
隔日诱导换液:每48h更换新鲜诱导培养基,持续补充分化因子,维持分化微环境,连续诱导7-9天。
多核细胞筛选:诱导结束后,筛选多核、体积较大的成熟破骨细胞,剔除未分化单核细胞。
骨吸收功能检测:通过骨片吸收坑实验验证细胞功能,具备正常骨吸收活性即为合格细胞。
即时实验使用:成熟破骨细胞无增殖能力、不可冻存传代,诱导成功后立即用于实验,避免细胞失活。
