人皮肤肥大细胞分离自皮肤组织;皮肤肥大细胞广泛分布于皮肤微血管周围,分泌多种细胞因子,参与免疫调节(T细胞、B细胞、APC细胞活化)。皮肤肥大细胞表达MHC分子、B7分子,具有APC功能。表达大量的IgE-Fc受体,释放过敏介质。具有弱吞噬功能,和血液的嗜碱粒细胞同样,具有强嗜碱性颗粒的组织细胞。存在于血液中的这类颗粒,含有肝素、组织胺、5-羟色胺,由细胞崩解释放出颗粒以及颗粒中的物质,可在组织内引起速发型过敏反应(炎症)。由于在肥大细胞上结合的IgE抗体和抗原的接触,使细胞多陷于崩坏。肥大细胞呈圆形或卵圆形,细胞核小,呈圆形或椭圆形,染色浅,位于细胞中央。细胞常成堆或单个分布于血管附近。细胞呈圆形或卵圆形,细胞质中充满大小一致、染成蓝紫色的颗粒,均匀分布在核周围。
产品属性
产品名称 人皮肤肥大细胞
组织来源 皮肤组织
默认种属 人,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 人皮肤肥大细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 圆形、梭形、多角形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
人皮肤肥大细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的人皮肤肥大细胞经CD117免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的人皮肤肥大细胞采用胶原酶-胰蛋白酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
真皮组织分离:无菌分离皮肤真皮层组织,剔除表皮、皮下脂肪,仅保留含肥大细胞的真皮结缔组织。
温和酶解释放细胞:组织剪碎后用中性蛋白酶低温消化1h,温和解离肥大细胞,避免破坏细胞内颗粒结构。
密度梯度纯化:利用Percoll密度梯度离心法,分离纯化肥大细胞,去除成纤维细胞、上皮细胞等杂细胞。
悬浮静置培养:肥大细胞为半悬浮细胞,采用无包被培养板悬浮培养,专用肥大细胞培养基静置养护,不强制贴壁。
轻柔换液处理:每2天低速离心换液,严禁直接倾倒培养基,防止流失悬浮肥大细胞,保留活性细胞。
无传代培养:原代肥大细胞增殖能力极弱,仅可原代短期培养,不进行传代操作,培养周期不超过7天。
颗粒完整性检测:显微镜下观察细胞胞内颗粒饱满、细胞形态圆润,无脱颗粒、无破裂,即为活性合格细胞。
