人膀胱癌组织源细胞分离自癌组织;癌(cancer)是指起源于上皮组织的恶性肿瘤,是恶性肿瘤中最常见的一类。相对应的,起源于间叶组织的恶性肿瘤统称为肉瘤。有少数恶性肿瘤不按上述原则命名,如肾母细胞瘤、恶性畸胎瘤等。一般人们所说的“癌症”习惯上泛指所有恶性肿瘤。癌症具有细胞分化和增殖异常、生长失去控制、浸润性和转移性等生物学特征,其发生是一个多因子、多步骤的复杂过程,分为致癌、促癌、演进三个过程,与吸烟、感染、职业暴露、环境污染、不合理膳食、遗传因素密切相关。癌细胞,是一种变异的细胞,是产生癌症的病源。癌细胞与正常细胞不同,有无限增殖、可转化和易转移三大特点,能够无限增殖并破坏正常的细胞组织。癌细胞除了分裂失控外(能进行多极分裂),还会局部侵入周围正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分。分恶性和良性两种。
产品属性
产品名称 人膀胱癌组织源细胞
组织来源 膀胱癌组织
默认种属 人,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 人膀胱癌组织源细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 梭形、多角形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
人膀胱癌组织源细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的人膀胱癌组织源细胞,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的癌组织源细胞采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
肿瘤组织无菌处理:新鲜膀胱癌组织离体30min内处理,无菌PBS+双抗浸泡冲洗5次,彻底去除血液、坏死组织及微生物污染,剔除正常膀胱黏膜及脂肪组织。
酶解分离细胞:将肿瘤组织剪碎至糊状,加入0.2%胶原酶IV,37℃恒温振荡消化2h,期间每隔15min轻柔吹打一次,充分解离肿瘤原代细胞。
过滤纯化细胞:消化结束后,依次通过100目、200目无菌滤网过滤,去除未消化组织残渣,收集单细胞悬液,300g离心8min,弃上清收集细胞沉淀。
高糖培养基培养:用含15%胎牛血清的高糖DMEM完全培养基重悬细胞,按2×10⁵个/mL密度接种,37℃、5%CO₂培养,适配肿瘤细胞高增殖代谢需求。
动态换液筛选:培养24h后首次换液,去除死细胞及杂细胞,后续每48h换液,持续筛选稳定增殖的肿瘤源细胞,淘汰衰老凋亡细胞。
快速传代扩增:细胞融合度达75%即可传代(肿瘤细胞增殖快,避免过度密集老化),常规胰酶消化1-2min,终止离心后1:3比例分瓶扩增。
肿瘤特性鉴定:扩增后观察细胞形态,肿瘤细胞呈不规则多边形、堆叠生长,无接触抑制,同时通过细胞增殖实验验证其恶性增殖特性,合格后冻存备用。
