人脑微血管内皮细胞分离自大脑皮质组织；脑微血管内皮细胞是血脑屏障的主要组成成分，它是组成脑微血管腔面单层扁平上皮样细胞，能够限制可溶性物质和细胞等从血液进入大脑，大脑微血管内皮细胞与外周内皮细胞相比具有一些相同特性。它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在脑血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。与外周内皮细胞相同，大脑微血管内皮细胞表面表达细胞粘附分子，调控白细胞进入大脑。由于微血管内皮细胞的器官特异性，内皮细胞通常取源于疾病研究的相关组织。其主要特征如下：①脑微血管内皮细胞存在许多细胞间紧密连接，产生很高的跨内皮阻抗，延迟细胞旁的通量；②脑微血管内皮细胞缺乏内皮细胞的窗孔结构，其液相物质胞饮水平较低；③脑微血管内皮细胞具有不对称定位酶和载体介导转运系统，从而产生“两极分化”的表现型。
产品属性
产品名称 人脑微血管内皮细胞
简称 BMVECs
组织来源 大脑皮质组织
默认种属 人，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）
培养基： 人脑微血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 内皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
人脑微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的人脑微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的人脑微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
培养瓶预处理：实验前用快速包被液处理T25培养瓶，加入2mL包被液完全覆盖培养底面，室温静置5min，吸弃包被液，无需过夜风干，直接备用，构建适配内皮细胞的贴壁基质。
细胞复苏纯化：冻存细胞37℃快速融化后，移入含内皮细胞完全培养基的离心管，轻柔混匀，400g离心10min，通过低速梯度离心去除细胞碎片与杂细胞，提升细胞纯度。
精准接种培养：纯化后的细胞用专用培养基重悬，调整密度为3×10⁵个/mL，接种于预处理的培养瓶中，37℃、5%CO₂培养，初期静置48h禁止移动培养瓶，保障细胞贴壁成型。
阶段性换液：接种48h后首次半量换液，保留半数原有培养基维持细胞微环境，后续每24h全量换液一次，严格去除悬浮杂质，适配内皮细胞高代谢特性。
短时温和消化：细胞融合至90%以上传代，PBS清洗后，加入微量胰酶-EDTA，37℃精准消化60-90s，镜下细胞轻微脱壁即终止消化，避免过度消化损伤内皮细胞屏障结构。
屏障功能检测：培养3-5天后，通过Transwell小室检测细胞跨膜电阻，验证血脑屏障模型活性，电阻值稳定后即可用于后续实验。
低温冻存管控：对数生长期细胞收集后，用含血清专用冻存液重悬，细胞密度控制为8×10⁵个/管，程序降温4℃30min、-20℃1h、-80℃过夜，次日转入液氮。
