人卵巢颗粒细胞分离自卵巢组织;卵巢是雌性动物的生殖器官,卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同,仅左侧发育(右侧已退化),呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡,卵泡呈黄色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢,但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构,而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官,它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、淋巴管和神经。卵巢颗粒细胞是卵巢的主要功能细胞,其增殖与分化直接影响着卵泡的生长启动、发育、排卵、黄体形成以及甾体激素分泌等卵巢功能活动。卵巢颗粒细胞是卵泡内的最大细胞群,也是主要的功能细胞,卵泡发育的显著标志之一就是颗粒细胞迅速生长及增殖,而成年动物的卵泡闭锁主要是由颗粒细胞凋亡引起,尤其在卵泡发育后期,此外,颗粒细胞还与卵泡膜细胞共同完成卵巢激素的合成,维持着有利于卵母细胞生长和成熟的微环境。细胞形状呈圆形或椭圆形。
产品属性
产品名称 人卵巢颗粒细胞
组织来源 卵巢组织
默认种属 人,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)
培养基: 人卵巢颗粒细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
人卵巢颗粒细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的人卵巢颗粒细胞经FSHR免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的人卵巢颗粒细胞采用先机械分离,而后胶原酶消化,最后差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
细胞复苏:卵巢颗粒细胞功能特异性高、增殖弱,超温和复苏。37℃慢速解冻,消毒后移入颗粒细胞专用培养基,1000rpm离心5min,极轻柔重悬,静置48h贴壁。
细胞换液:复苏48h首次换液,后续每72h换液,补充激素相关营养,维持内分泌功能活性。
细胞传代:细胞满壁融合后传代,低浓度消化液消化5min,按1:2极低比例传代,严控传代次数,保留分泌功能。
细胞消化:低损伤消化,避免破坏激素分泌功能,轻柔操作,最大限度保留细胞活性。
细胞冻存:高血清保护冻存,92%FBS+8%DMSO,细胞密度6×10⁵个/mL,慢速冻存保护功能。
细胞接种:高密度接种9×10³个/cm²,依赖细胞间信号维持功能,静置8h贴壁。
细胞质控:细胞形态圆润规整、排列致密、分泌功能稳定,无老化凋亡,无菌无污染,适用于卵巢内分泌、卵泡发育研究。
