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人结肠癌组织源细胞

人结肠癌组织源细胞

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产品概述 product description

人结肠癌组织源细胞分离自患有结肠癌病人的结肠癌组织;结肠癌是常见的发生于结肠部位的消化道恶性肿瘤,好发于直肠与乙状结肠交界处,以40-50岁年龄组发病率最高,男女之比为2-3:1。发病率占胃肠道肿瘤的第3位。结肠癌主要为腺癌、黏液腺癌、未分化癌。大体形态呈息肉状、溃疡型等。结肠癌可沿肠壁环行发展,沿肠管纵径上下蔓延或向肠壁深层浸润,除经淋巴管、血流转移和局部侵犯外,还可向腹腔内种植或沿缝线、切口面扩散转移。慢性结肠炎患者、结肠息肉患者、男性肥胖者等为易感人群。人结肠癌组织源细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。人结肠癌组织源细胞在生物医药领域有不可替代性作用。

产品属性

产品名称 人结肠癌组织源细胞

组织来源 结肠癌组织

默认种属 人,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 人结肠癌组织源细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 梭形、多角形

传代比例: 1:2

传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳

消化液: 0.25%胰蛋白酶

人结肠癌组织源细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的人结肠癌组织源细胞,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的癌组织源细胞采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

细胞复苏:结肠癌细胞增殖迅猛、耐受性强,采用快速复苏流程。37℃水浴1min内完全解冻,消毒管壁后,细胞悬液移入高糖完全培养基,800rpm低速离心4min,减少细胞机械损伤,重悬后快速接种,缩短常温暴露时间。

细胞换液:复苏12h首次换液,清除大量复苏凋亡细胞,后续每24h换液一次,维持高营养供给。无需PBS润洗,直接换液,适配癌细胞快速代谢需求,避免营养匮乏导致细胞坏死。

细胞传代:细胞融合度70%即可传代,癌细胞无接触抑制,极易堆叠成团。弃液润洗后,胰酶消化40-60s,快速脱壁终止消化,离心后按1:4~1:8超高比例传代,避免细胞密集堆叠坏死。

细胞消化:消化速度快、时间短,严格控制1min内完成,防止过度消化导致细胞活性下降。吹打快速均匀,彻底打散细胞团块,保证单细胞悬液,避免堆叠生长影响实验结果。

细胞冻存:选取对数生长期、无堆叠坏死的活跃癌细胞,冻存液配比80%完全培养基+15%FBS+5%DMSO。细胞密度5×10⁶个/mL,快速分装降温,液氮保存,适配癌细胞高增殖特性。

细胞接种:药物筛选实验低密度接种2×10³个/cm²,克隆形成实验超低密度接种1×10³个/cm²,增殖实验常规5×10³个/cm²。接种后快速摇匀,2h快速贴壁生长。

细胞质控:结肠癌细胞形态饱满、增殖极速、可堆叠生长,无大量悬浮死细胞,无污染、无老化。细胞增殖倍数稳定、克隆形成能力正常,支原体检测阴性,适用于肠癌增殖、侵袭、耐药、靶向药物研究。