人胶质瘤组织源细胞分离自癌组织;癌(cancer)是指起源于上皮组织的恶性肿瘤,是恶性肿瘤中最常见的一类。相对应的,起源于间叶组织的恶性肿瘤统称为肉瘤。有少数恶性肿瘤不按上述原则命名,如肾母细胞瘤、恶性畸胎瘤等。一般人们所说的“癌症”习惯上泛指所有恶性肿瘤。癌症具有细胞分化和增殖异常、生长失去控制、浸润性和转移性等生物学特征,其发生是一个多因子、多步骤的复杂过程,分为致癌、促癌、演进三个过程,与吸烟、感染、职业暴露、环境污染、不合理膳食、遗传因素密切相关。癌细胞,是一种变异的细胞,是产生癌症的病源。癌细胞与正常细胞不同,有无限增殖、可转化和易转移三大特点,能够无限增殖并破坏正常的细胞组织。癌细胞除了分裂失控外(能进行多极分裂),还会局部侵入周围正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分。分恶性和良性两种。
产品属性
产品名称 人胶质瘤组织源细胞
组织来源 胶质瘤组织
默认种属 人,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 人胶质瘤组织源细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 梭形、多角形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
人胶质瘤组织源细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的人胶质瘤组织源细胞,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的癌组织源细胞采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
细胞复苏:胶质瘤干细胞特性较强,复苏全程低温避光操作。37℃水浴快速解冻,1min内完成,消毒管壁后,将细胞悬液移入含神经细胞专用完全培养基的离心管,900rpm离心6min,去除冻存液残留,轻柔重悬后接种,低氧适配培养环境静置复苏。
细胞换液:复苏后24h半量换液,仅更换50%陈旧培养基,保留部分细胞分泌因子,适配胶质瘤细胞生长微环境。后续每36h全量换液,去除悬浮凋亡细胞与代谢废物,维持培养基营养平衡,避免微环境突变导致细胞干性丢失。
细胞传代:细胞融合度达80%传代,胶质瘤细胞增殖异质性强。弃培养基,PBS轻洗,加入温和神经细胞消化液,37℃消化5min,细胞脱壁后终止消化。轻柔吹打分散细胞团,离心后按1:4比例传代,保留细胞异质性,维持原有生长特性。
细胞消化:严格使用无损伤温和消化液,禁止高浓度胰酶处理。消化时间严格控制在1-5min,仅消化细胞贴壁位点,不损伤细胞表面干性受体。吹打采用单点轻柔吹打,避免剧烈震荡,保留细胞活性与干细胞特性。
细胞冻存:选取干性稳定、增殖均匀的对数生长期胶质瘤细胞,冻存液配比为80%神经完全培养基+15%FBS+5%DMSO。细胞密度1×10⁶个/mL,分装后梯度降温,液氮避光保存,减少干细胞特性衰减。
细胞接种:根据实验需求差异化接种,干性维持实验低密度接种2×10³个/cm²,增殖实验高密度接种7×10³个/cm²。接种后静置培养,避免频繁观察挪动,保证细胞稳定贴壁、维持干性状态。
细胞质控:正常胶质瘤细胞形态不规则、胞体饱满、增殖活跃,存在少量悬浮干细胞团,无大量凋亡碎片。细胞干性稳定、无异型分化,无菌、无支原体污染,增殖速率均匀,可用于肿瘤增殖、侵袭、药物耐药机制研究。
