人甲状腺癌组织源细胞分离自癌组织;癌(cancer)是指起源于上皮组织的恶性肿瘤,是恶性肿瘤中最常见的一类。相对应的,起源于间叶组织的恶性肿瘤统称为肉瘤。有少数恶性肿瘤不按上述原则命名,如肾母细胞瘤、恶性畸胎瘤等。一般人们所说的“癌症”习惯上泛指所有恶性肿瘤。癌症具有细胞分化和增殖异常、生长失去控制、浸润性和转移性等生物学特征,其发生是一个多因子、多步骤的复杂过程,分为致癌、促癌、演进三个过程,与吸烟、感染、职业暴露、环境污染、不合理膳食、遗传因素密切相关。癌细胞,是一种变异的细胞,是产生癌症的病源。癌细胞与正常细胞不同,有无限增殖、可转化和易转移三大特点,能够无限增殖并破坏正常的细胞组织。癌细胞除了分裂失控外(能进行多极分裂),还会局部侵入周围正常组织甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体其他部分。分恶性和良性两种。
产品属性
产品名称 人甲状腺癌组织源细胞
组织来源 甲状腺癌组织
默认种属 人,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 人甲状腺癌组织源细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 梭形、多角形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
人甲状腺癌组织源细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的人甲状腺癌组织源细胞,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的癌组织源细胞采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
细胞复苏:37℃水浴快速解冻冻存细胞,全程控制解冻时间1min内,减少癌细胞低温损伤。解冻后管壁酒精消毒,将细胞悬液移入含5mL癌组织细胞专用高糖完全培养基的离心管,轻柔吹打混匀,800rpm低速离心5min,降低癌细胞机械损伤,弃上清后重悬接种,置于37℃、5%CO₂饱和湿度培养箱培养。
细胞换液:癌细胞增殖速率快,复苏12h后首次换液,清除复苏过程中死亡的破碎细胞。后续每24h换液一次,弃旧液后无需PBS润洗,直接加入预热新鲜完全培养基,避免润洗导致脆弱癌细胞脱落,保证细胞营养持续供给,维持快速增殖状态。
细胞传代:细胞融合度达75%-80%即可传代(癌细胞接触抑制弱,避免过度密集)。弃培养基,PBS轻洗1次,加入0.25%胰酶消化液,37℃消化30-60s,细胞快速脱壁后立即终止消化。收集悬液离心,按1:3~1:6高比例传代,适配癌细胞高速增殖特性,分瓶后补足培养基恒温培养。
细胞消化:甲状腺癌细胞贴壁能力较弱,消化操作轻柔快速。严格控制消化时间不超过1min,显微镜下见细胞皱缩变圆即可终止,禁止长时间胰酶作用。吹打时力度轻柔,单次吹打量不宜过多,防止细胞破裂凋亡,保证细胞活性与完整性。
细胞冻存:选取对数生长期、增殖活跃的癌细胞,避免使用密集老化细胞。冻存液配比为85%完全培养基+10%FBS+5%DMSO,温和保护癌细胞。细胞密度调整至2×10⁶个/mL,分装冻存管,梯度降温后液氮保存,缩短常温放置时间,最大程度保留细胞增殖活性。
细胞接种:根据实验类型调整密度,增殖实验3×10³个/cm²,药物干预实验6×10³个/cm²。接种后无需剧烈摇晃,静置平稳混匀,防止癌细胞聚集成团。接种后2h即可快速贴壁,可提前观察贴壁状态,及时更换培养基去除漂浮死细胞。
细胞质控:正常甲状腺癌细胞形态多样、边界清晰、增殖速度快,无接触抑制,密集生长无堆叠紊乱。每日观察有无细菌、真菌污染,细胞无大量悬浮凋亡、无空泡老化,增殖倍数稳定,支原体检测阴性,方可用于肿瘤机制、药物筛选实验。
