静脉内皮细胞/HUVEC细胞是血管生物学研究中最常用的内皮细胞模型，分离自人脐静脉。这类细胞通过分泌NO、前列环素等血管活性物质调节血管张力，参与血管新生、凝血和炎症反应，广泛应用于血管生物学、肿瘤血管生成和药物筛选研究。
产品属性 product attributes
产品名称: 静脉内皮细胞/HUVEC细胞
组织来源：人脐静脉
细胞形态：多角形或短梭形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，接触抑制明显
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：内皮细胞专用培养基，添加FBS、内皮细胞生长因子(ECGF)、肝素、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：推荐使用明胶或纤维连接蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的静脉内皮细胞/HUVEC细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的静脉内皮细胞/HUVEC细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:冻存管 37℃水浴速融，酒精消毒管壁，转入无菌离心管加内皮细胞完全培养基混匀。
离心沉淀:1000 rpm 离心 5 min，弃上清；HUVEC 专用内皮培养基重悬沉淀。
接种培养:接种于明胶包被 T25 培养瓶，置于 37℃，5% CO₂培养箱孵育。
换液除杂:复苏后 18‑24 h 换液，PBS 轻洗，弃漂浮死细胞；之后每 2 天换新鲜内皮完全培养基。
消化传代:汇合度 75‑80%；弃液，PBS 洗；低浓度胰酶短暂消化 1‑2 min，内皮细胞不可过度消化。完全培养基终止消化。
分瓶培养:收集悬液离心，重悬；传代比例 1:2，内皮细胞不要高比例传代，避免衰老。
冻存鉴定:消化收集细胞配制冻存液；液氮保存；鉴定：CD31、vWF 内皮标志物免疫荧光检测，支原体阴性检测。
