II型肺泡上皮细胞位于肺泡壁，是肺泡表面活性物质的主要合成细胞。这类细胞分泌肺表面活性物质降低肺泡表面张力，维持肺泡开放，同时具有干细胞特性，可增殖分化为I型肺泡上皮细胞修复肺泡损伤，在急性肺损伤和肺纤维化研究中发挥关键作用。
产品属性 product attributes
产品名称: II型肺泡上皮细胞
组织来源：人/大鼠正常肺组织
细胞形态：立方形或矮柱状，胞体较小
生长特性：贴壁生长，需依赖细胞外基质支撑
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：上皮细胞专用培养基，添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、角质细胞生长因子(KGF)等生长添加剂
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)或Matrigel基质胶包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的II型肺泡上皮细胞经SP-C免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的II型肺泡上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:37℃水浴快速解冻冻存细胞，酒精消毒管壁，转移离心管，加入肺泡上皮专用完全培养基。
低速离心:800 rpm 离心 5 min（降低离心转速减少上皮损伤），弃上清。
包被板接种:用肺泡上皮培养基重悬，接种于多聚‑L‑赖氨酸包被培养瓶，放入 CO₂培养箱。
换液操作:复苏后 24 h 换液，PBS 轻柔冲洗，后续每 2 天换液；避免强力吹打。
温和消化:汇合度 70‑75%；弃培养基，PBS 清洗；使用低浓度胰酶，消化时间 1‑2 min，镜下监控，上皮极易脱落。血清培养基终止消化。
传代分瓶:收集细胞悬液，低速离心，重悬；传代比例 1:2，原代肺泡上皮建议传代≤3 代。
冻存质控:70% 汇合度细胞冻存；定期检测 SP‑C（II 型肺泡上皮标志物），支原体、细菌真菌污染筛查。
