支气管上皮细胞覆盖于支气管腔面，构成气道黏膜屏障。这类细胞通过分泌黏液和抗菌肽抵御病原体入侵，通过纤毛运动清除异物，参与气道免疫防御和损伤修复，是研究哮喘、慢性支气管炎和肺癌等呼吸系统疾病的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 支气管上皮细胞
组织来源：人/大鼠正常支气管组织
细胞形态：上皮细胞样，柱状或多角形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，需依赖细胞外基质支撑
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：上皮细胞专用培养基，添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、胰岛素、转铁蛋白等生长添加剂
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的支气管上皮细胞经Cytokeratin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的支气管上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏:冻存管 37℃水浴融化，75% 酒精消毒外壁，无菌移入离心管，加入支气管上皮专用培养基。
低速离心:800 rpm 离心 5 min，弃上清废液。
包被培养:培养基重悬细胞沉淀，接种于多聚赖氨酸包被 T25 瓶，37℃ 5% CO₂孵育。
定时换液:复苏后 24 h 首次换液去除死细胞；之后每 2‑3 天更换新鲜上皮培养基，避免细胞干涸。
胰酶消化:汇合度 75%；弃旧培养基，PBS 洗涤 2 次；胰酶‑EDTA 消化 1‑2 min，看到细胞回缩立刻终止。
传代分瓶:收集细胞悬液，离心，重悬；传代比例 1:2，原代细胞控制传代次数。
冻存与鉴定:细胞冻存；免疫荧光 CK‑5/CK‑19 上皮标志物鉴定；支原体检测。
