小肠成纤维细胞是小肠黏膜下层的主要间质细胞，为上皮细胞、平滑肌细胞等提供结构支持和营养供应。这类细胞不仅参与肠道组织的构建和修复，还通过分泌细胞因子、生长因子和细胞外基质成分，调节肠道免疫微环境，影响上皮细胞增殖分化和肠道屏障功能。
产品属性 product attributes
产品名称: 小肠成纤维细胞
组织来源：人/小鼠/大鼠正常小肠组织黏膜下层
细胞形态：长梭形或不规则三角形，呈成纤维细胞样
生长特性：贴壁生长，密度低时呈放射状或漩涡状排列，高密度时重叠生长
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：DMEM/Ham's F12培养基，添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:3至1:5比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
质量检测 quality test
实验室分离的小肠成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的小肠成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过成纤维细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
准备工作：超净台灭菌，取出成纤维细胞专用完全培养基、T25 瓶、离心耗材，培养基 37℃预热。
快速解冻细胞：冻存细胞取出液氮，37℃水浴快速融化。
稀释冻存液：酒精消毒冻存管，细胞悬液缓慢加入 5 mL 预热培养基中混匀。
离心收集细胞：1000 rpm，室温离心 5 min。
重悬细胞：弃上清，加入 2‑3 mL 完全培养基轻柔吹打重悬。
接种：悬液转入 T25 培养瓶，补足培养基至 5 mL，十字摇晃均匀。
孵育培养：37 ℃、5% CO₂培养箱培养；成纤维细胞增殖快，2 天观察细胞密度，适时换液传代。
