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小肠平滑肌细胞

小肠平滑肌细胞

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产品概述 product description

小肠平滑肌细胞分离自小肠壁肌层,是肠道动力的主要执行者。小肠肌层分为内环肌和外纵肌两层,平滑肌细胞通过缝隙连接形成功能合胞体,同步收缩产生蠕动波,推动食糜向大肠方向移动。这类细胞具有可兴奋性和自律性,能接受神经、体液和机械信号调节,维持肠道正常运动节律。

产品属性 product attributes

产品名称: 小肠平滑肌细胞

组织来源:人/小鼠/大鼠正常小肠组织

细胞形态:长梭形或不规则形,呈成纤维细胞样外观

生长特性:贴壁生长,低密度时交织成网状,高密度时呈旋涡状或栅栏状排列

保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年

核心功能:通过节律性收缩驱动肠蠕动,参与食物消化运输;体外培养可用于研究平滑肌收缩机制、肠道动力障碍等疾病模型
培养基:平滑肌细胞专用培养基,添加10%胎牛血清、胰岛素、氢化可的松、表皮生长因子(EGF)等生长添加剂

培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%

换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基

传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:4比例传代

消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟

体外寿命:可传代培养5-8代,建议在P3-P5代进行实验

质量检测 quality test

实验室分离的小肠平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介 method

实验室分离的小肠平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过平滑肌细胞专用培养基培养筛选制备而来。

操作步骤 operation steps

准备工作:超净台紫外灭菌 30 min,取出平滑肌细胞专用完全培养基、T25 培养瓶、15 mL 离心管,培养基 37℃水浴预热。

细胞解冻复苏:取出冻存管,立即投入 37℃水浴,快速晃动,1‑2 min 融化冻存液。

稀释细胞悬液:冻存管外壁酒精消毒,移入安全柜;将细胞悬液缓慢加到含 5 mL 完全培养基的离心管,轻柔混匀。

离心沉淀细胞:配平后离心机 1000 rpm,室温离心 5 min。

重悬细胞沉淀:弃上清废液,加入 2‑3 mL 平滑肌完全培养基,轻柔吹打,制备单细胞悬液,禁止大力吹打损伤平滑肌。

接种培养瓶:细胞悬液移入 T25 瓶,补培养基至 5 mL,十字摇匀。

培养孵育:放置 37 ℃、5% CO₂培养箱;48 h 观察贴壁,每 2‑3 天更换新鲜培养基。