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大鼠真皮微血管内皮细胞

大鼠真皮微血管内皮细胞

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产品概述 product description

大鼠真皮微血管内皮细胞分离自背腹部皮肤组织;真皮,位于表皮深层,向下与皮下组织相连,真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起,埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维,使皮肤既有弹性,又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞(MEC)在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域,由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟,人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比,对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞,则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。

产品属性

产品名称 大鼠真皮微血管内皮细胞

简称 DMECs

组织来源 背腹部皮肤组织

默认种属 SD大鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)

培养基: 大鼠真皮微血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 内皮细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传2-3代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

大鼠真皮微血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的大鼠真皮微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的大鼠真皮微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

分离大鼠真皮组织,剪碎后使用胶原酶与透明质酸酶联合消化微血管结构。

通过 CD31 免疫磁珠分选,特异性富集真皮微血管内皮细胞,剔除成纤维细胞。

接种在纤维连接蛋白包被培养板,使用内皮细胞专用培养基添加 VEGF 生长因子。

培养 2 天后镜检,细胞呈短梭形、可形成微血管管腔样结构。

2 天更换培养基,严格控制血清浓度,过高血清会诱导内皮细胞老化。

可开展血管新生、皮肤微循环障碍相关体外成管实验。

冻存需使用内皮专用冻存液,复苏后及时验证 CD31、vWF 内皮标志物纯度。