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大鼠小脑颗粒细胞

大鼠小脑颗粒细胞

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产品概述 product description

大鼠小脑颗粒细胞分离自小脑组织;神经元是神经系统最基本的结构与功能单位,小脑颗粒神经元是体积较小的神经元,直径约10 μm,在中枢神经系统中含量非常丰富,近乎神经元数量的一半。由于小脑神经元的生长、分化和大脑皮层神经元相似,而且数量多、便于取材,因此小脑颗粒神经元是研究神经元生长发育、神经轴突再生及神经疾病发生机制和临床神经药理的重要手段。小脑颗粒神经元是小脑主要的中间神经元,在哺乳动物的小脑内数量最为丰富。颗粒神经元的轴突与苔状纤维和爬行纤维相联系,形成小脑皮层内的神经元环路,在小脑的神经活动中起着非常重要的作用。在动物传染性海绵状脑病中,病变可波及小脑颗粒神经元,导致小脑皮层的神经元环路受损,从而呈现神经性行为失调。研究小脑颗粒神经元在动物传染性海绵状脑病病理学变化中的反应、病理发生的机理特别是分子机理,有赖于小脑颗粒神经元细胞模型的建立。小脑颗粒细胞的轴突是沿冠状轴分布的平行纤维,正是这种排列保证了兴奋的单向传导,这是小脑功能理论中的关键假设,小脑颗粒细胞通过g-氨基丁酸接受戈尔吉细胞的抑制性突触的信息传入。

产品属性

产品名称 大鼠小脑颗粒细胞

组织来源 小脑组织

默认种属 SD大鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)

培养基: 大鼠小脑颗粒细胞完全培养基(含B-27、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 神经元细胞样

传代比例: 不传代

传代特性: 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群

消化液: 0.25%胰蛋白酶

大鼠小脑颗粒细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的大鼠小脑颗粒细胞经NSE免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的大鼠小脑颗粒细胞采用胰蛋白酶消化法结合神经元专用培养基、化学试剂抑制法筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

无菌取出新生大鼠小脑组织,预冷 HBSS 缓冲液漂洗去除脑膜与血管杂质。

眼科剪将组织剪碎至 1mm³ 小块,加入胰蛋白酶 - EDTA 消化液 37℃水浴轻柔孵育 18min。

加入含胎牛血清的完全培养基终止消化,巴氏管缓慢吹打制备单细胞悬液。

采用差速贴壁法去除成纤维杂细胞,将细胞悬液接种于多聚赖氨酸包被培养皿。

置于 37℃、5% CO₂细胞培养箱静置培养,48h 后更换新鲜神经元专用培养基。

每日镜检观察颗粒细胞轴突生长状态,及时清除漂浮死细胞碎片。

待细胞汇合度达 75%,可开展药物干预、电生理记录或基因转染相关实验。