大鼠视网膜前体细胞分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处最多。第二层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力最强。
产品属性
产品名称 大鼠视网膜前体细胞
组织来源 视网膜组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠视网膜前体细胞完全培养基(含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 半贴壁半悬浮
细胞形态: 圆形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠视网膜前体细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠视网膜前体细胞经Nestin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠视网膜前体细胞采用胰蛋白酶消化法结合专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
前期准备:低吸附培养板预处理,预热干细胞专用无血清培养基、预冷HBSS、温和消化酶,无菌低温避光操作。
无菌取材:选取新生大鼠眼球,无菌剥离完整视网膜神经层,彻底剔除色素上皮、脉络膜及血管组织,预冷漂洗。
组织处理:冰上精细剪碎视网膜组织,轻柔研磨松散,最大程度保留前体细胞活性。
酶解消化:温和消化酶37℃短时消化10min,轻柔间断吹打,避免干细胞损伤。
终止过滤:干细胞培养基终止消化,过滤去除组织残渣,获取单细胞悬液。
离心重悬:1000rpm低速离心5min,弃上清,无血清专用培养基轻柔重悬细胞。
接种培养:低密度悬浮接种,静置培养,每3d半量换液,维持前体细胞干性与增殖活性。
