大鼠食管平滑肌细胞分离自食管组织；食管可分为颈段、胸段和腹段，脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，肌层上1/3段为骨骼肌，下1/3为平滑肌，中段为骨骼肌和平滑肌混合组成。其中，肌纤维的排列方式分为内环形和外纵形两层。食管的蠕动是由食管平滑肌收缩严格控制，食管还有括约肌，位于环状软骨水平的，称为食管上括约肌；位于食管下端，一部分在膈上，穿过膈孔，另一部分在膈下的高压带，称为食管下括约肌。食管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性
产品名称 大鼠食管平滑肌细胞
组织来源 食管组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 大鼠食管平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠食管平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠食管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠食管平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
前期准备：无菌培养板常规预处理，预热平滑肌专用培养基、预冷HBSS、Ⅱ型胶原酶，备好精细解剖器械，无菌避光操作。
无菌取材：无菌剥离大鼠食管组织，剔除食管外层结缔组织、脂肪及内层黏膜上皮，保留中间完整平滑肌肌层。
组织处理：预冷HBSS漂洗肌层组织，剪碎至1mm³细小组织块，彻底去除残留黏膜与血管杂质。
酶解消化：Ⅱ型胶原酶37℃水浴消化18min，间断轻晃，使平滑肌组织充分松散解离。
终止过滤：完全培养基终止酶解，轻柔吹打分散细胞，过滤去除未消化组织残渣。
离心重悬：1200rpm离心5min，弃上清，平滑肌专用培养基轻柔重悬细胞。
接种培养：均匀接种细胞，静置培养24h换液，后续每2–3d换液，通过差速贴壁去除成纤维杂细胞。
