大鼠肾上腺皮质细胞分离自肾上腺组织;肾上腺是机体相当重要的内分泌器官,由于位于两侧肾脏的上方,故名肾上腺。肾上腺左右各一,位于肾的上方,共同为肾筋膜和脂肪组织所包裹。左肾上腺呈半月形,右肾上腺为三角形。从侧面观察,腺体分肾上腺皮质和肾上腺髓质两部分,周围部分是皮质,内部是髓质。肾上腺内部是髓质部分,分泌肾上腺素和去甲肾上腺素。这些激素在应激状态释放增多,能够帮助升高血压,加快心率,升高血糖,动员全身的储备物质,为机体与外界环境的抗争作好充分准备。肾上腺外部是皮质部分,分泌醛固酮、皮质醇和少量的雌雄激素。醛固酮能够促进小便中尿钾的排出和尿钠的重吸收,正常数量的醛固酮,对维持机体正常血压有重要作用。但是如果过多分泌,会导致高血压和低血钾。皮质醇是机体必需的激素之一。当机体处于应激状态时,比如感冒,发烧,遇到突发事件的时候,肾上腺皮质分泌大量的皮质醇,这些皮质醇能够动员机体的存储能源,为应对内部或者外部重要事件提供充分的物质准备。当皮质醇缺乏时,机体在遇到重大事件的时候,往往缺乏足够应对能力,容易被病毒或外界压力所击倒。肾上腺产生的雄激素,对雄性来讲,并非必不可少,但是对雌性而言,是雄激素的一个重要来源。
产品属性
产品名称 大鼠肾上腺皮质细胞
组织来源 肾上腺组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 大鼠肾上腺皮质细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 梭形、多角形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-3代左右;2代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠肾上腺皮质细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠肾上腺皮质细胞经3β-HSD免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠肾上腺皮质细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
前期准备:提前用无菌明胶包被培养板,37℃静置过夜备用;预热肾上皮专用完全培养基、无菌HBSS、0.25%胰蛋白酶,备好无菌解剖器械、70μm细胞筛,全程无菌超净台操作。
无菌取材:选取新生1–3d大鼠,75%乙醇全身消毒,无菌剥离双侧肾脏,剔除肾脏包膜、血管及髓质组织,仅保留完整肾皮质组织,移入预冷无菌HBSS中漂洗去除血污。
组织处理:将肾皮质转移至无菌培养皿,剪碎至1mm³均匀组织块,反复HBSS漂洗2–3次,彻底去除残留血细胞、杂质及松散结缔组织。
酶解消化:加入足量0.25%胰蛋白酶覆盖组织块,37℃恒温水浴消化10–12min,每3min轻柔晃动一次,至组织块松散、边缘絮状脱落即可。
终止过滤:加入等量含血清完全培养基终止消化,轻柔反复吹打组织悬液,经70μm无菌细胞筛过滤,去除未消化的组织残渣与团块。
离心重悬:1000rpm低速离心5min,谨慎弃上清,避免丢失细腻细胞沉淀,用新鲜完全培养基轻柔重悬细胞,避免气泡产生。
接种培养:调整细胞密度后接种,置于恒温培养箱静置培养;48h内禁止移动培养板,2d后半量换液,清除死细胞与杂细胞,维持细胞纯度。
