大鼠肾皮质上皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。
产品属性
产品名称 大鼠肾皮质上皮细胞
组织来源 肾组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 大鼠肾皮质上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠肾皮质上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠肾皮质上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠肾皮质上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
前期准备:提前用无菌明胶包被培养板,37℃静置过夜备用;预热肾上皮专用完全培养基、无菌HBSS、0.25%胰蛋白酶,备好无菌解剖器械、70μm细胞筛,全程无菌超净台操作。
无菌取材:选取新生1–3d大鼠,75%乙醇全身消毒,无菌剥离双侧肾脏,剔除肾脏包膜、血管及髓质组织,仅保留完整肾皮质组织,移入预冷无菌HBSS中漂洗去除血污。
组织处理:将肾皮质转移至无菌培养皿,剪碎至1mm³均匀组织块,反复HBSS漂洗2–3次,彻底去除残留血细胞、杂质及松散结缔组织。
酶解消化:加入足量0.25%胰蛋白酶覆盖组织块,37℃恒温水浴消化10–12min,每3min轻柔晃动一次,至组织块松散、边缘絮状脱落即可。
终止过滤:加入等量含血清完全培养基终止消化,轻柔反复吹打组织悬液,经70μm无菌细胞筛过滤,去除未消化的组织残渣与团块。
离心重悬:过滤后细胞悬液1200rpm离心5min,弃上清,保留细胞沉淀,加入新鲜肾上皮完全培养基,轻柔吹打制备均匀单细胞悬液。
接种培养:细胞计数后,按适宜密度接种于包被好的培养板,置于37℃、5%CO₂饱和湿度培养箱;24h后首次换液,后续每2d半量换液,去除未贴壁杂细胞。
