大鼠神经干细胞分离自大脑皮质组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。神经干细胞具有分化为神经神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力,能自我更新,并足以提供大量脑组织细胞的细胞群。神经干细胞是一类具有分裂潜能和自更新能力的母细胞,它可以通过不对等的分裂方式产生神经组织的各类细胞。需要强调的是,在脑脊髓等所有神经组织中,不同的神经干细胞类型产生的子代细胞种类不同,分布也不同。神经干细胞作为干细胞的一种,它具有其它所有干细胞的基本特征:具有自我维持和自我更新能力,具有多种分化潜能,具有分化为本系统大部分类型细胞的能力,这种自我更新和分化潜能可以维持相当长的时间甚至终生,对损伤和疾病具有反应能力。神经干细胞在疾病、损伤状态下具有增殖、迁移,并向神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的能力,已成为神经系统损伤修复和再生研究的热点,体外建立稳定的神经干细胞培养模型是其基础和临床应用的前提。神经干细胞在培养3-4 d后,可形成神经球,神经球在培养基中呈悬浮生长,予以更换半量培基,1周后用吸管轻柔吹打球形克隆成为小的神经球和单细胞悬液,将部分细胞接种到新的培养瓶中,2×10⁵个细胞/瓶,每7-10 d传代1次,每隔3 d离心更换半量培养基1次,培养条件不变。
产品属性
产品名称 大鼠神经干细胞
组织来源 大脑皮质组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠神经干细胞完全培养基(含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 悬浮
细胞形态: 球形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: Accutase消化液或0.25%胰蛋白酶
大鼠神经干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠神经干细胞经Nestin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠神经干细胞采用胰蛋白酶消化后差速贴壁,结合神经干细胞专用培养基培养筛选制备而来,总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
实验准备:配制神经干细胞无血清增殖培养基,准备无菌分离耗材、细胞筛,提前预热缓冲液,选取胚胎大鼠脑组织。
无菌取材:无菌摘取胚胎大鼠大脑组织,冰上剔除脑膜、血管及杂质,保留神经干细胞富集区域组织。
组织处理:冰上精细剪碎脑组织,轻柔研磨松散,最大程度释放神经干细胞。
酶解消化:温和复合酶液37℃消化20min,轻柔震荡,避免干细胞干性损伤。
纯化离心:无血清培养基终止消化,过滤纯化,1000rpm低速离心5min,收集干细胞。
接种培养:干细胞专用培养基重悬,悬浮接种培养,恒温低氧环境培育神经球。
常规养护:每2天半量换液,不传代不扰动神经球,维持干细胞干性,按需分化或扩增。
