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大鼠气管平滑肌细胞

大鼠气管平滑肌细胞

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产品概述 product description

大鼠气管平滑肌细胞分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C”字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜,表面覆盖纤毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒,纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出,以净化吸入的气体。气管平滑肌是气管的重要结构组成之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用;能够保持气道张力,维持气道管状形态,从而有利于气体流通,保持肺部通气。气管平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。气管平滑肌细胞的异常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是气道重塑的关键。

产品属性

产品名称 大鼠气管平滑肌细胞

简称 TSMCs

组织来源 气管组织

默认种属 SD大鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠气管平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 成纤维细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳

消化液: 0.25%胰蛋白酶

大鼠气管平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的大鼠气管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的大鼠气管平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

实验准备:备好气管平滑肌专用培养基、无菌解剖套装、预冷HBSS缓冲液,提前处理培养器皿,选取幼年大鼠气管组织。

无菌取材:无菌剥离大鼠颈部完整气管,去除气管外围筋膜、脂肪及结缔组织,预冷HBSS漂洗干净表面血污。

组织处理:精细剥离气管外侧平滑肌肌层,剔除气管软骨与黏膜上皮,将纯平滑肌组织剪碎成均匀细小组织块。

纯化离心:血清培养基终止消化,无菌筛网过滤杂质,1200rpm离心6min,弃上清,获得纯净平滑肌细胞沉淀。

接种培养:新鲜完全培养基重悬细胞,校准接种密度,均匀接种于培养板,恒温恒湿培养箱静置贴壁。

常规养护:48h半量换液清除悬浮杂质,后续每2–3天换液一次,细胞长至80%汇合度即可用于后续实验。