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大鼠破骨细胞

大鼠破骨细胞

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产品概述 product description

大鼠破骨细胞分离自腿骨髓组织;破骨细胞是骨组织中的多核巨细胞,位于骨组织表面的浅凹处。目前一般认为破骨细胞是分离自骨骼外的造血系统,其前体可能属于造血干细胞的前单核细胞。破骨细胞的主要功能是维持骨吸收和骨形成的相对平衡,若失去这种平衡则发生病理性变化。因此多数学者从破骨细胞着手研究破骨细胞的结构、功能探讨骨吸收,形成相互平衡的机制。但破骨细胞是一种终末分化细胞,属于不增殖细胞群,不能增殖和传代,只能进行原代培养且存活时间较短。

产品属性

产品名称 大鼠破骨细胞

组织来源 腿骨髓组织

默认种属 SD大鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠破骨细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 多核、巨细胞

传代比例: 不传代

传代特性: 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群

消化液: 0.25%胰蛋白酶

大鼠破骨细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的大鼠破骨细胞经TRAP染色检测,纯度可达30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的大鼠破骨细胞采用机械分离法/密度梯度离心法和骨髓单核细胞诱导法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

无菌取大鼠双侧股骨、胫骨,剔除肌肉软组织,预冷 α-MEM 培养基反复冲洗骨髓腔获得骨髓细胞悬液。

细胞悬液过筛去除骨渣,离心收集沉淀,加入红细胞裂解液裂解红细胞,洗涤获得骨髓单核细胞。

用含 M-CSF(巨噬细胞集落刺激因子)的完全培养基重悬细胞,按适宜密度接种培养板,37℃孵育培养 3d 获得破骨前体细胞。

吸除旧培养基,更换同时添加 M-CSF 与 RANKL 诱导因子的分化培养基,开始定向诱导破骨分化。

2 天半量更换新鲜诱导培养基,持续培养 4–6d,观察多核巨大细胞形成情况。

进行 TRAP(抗酒石酸酸性磷酸酶)染色鉴定多核破骨细胞,统计成熟破骨数量。

后续可开展骨吸收窝实验、药物干预、基因检测等功能检测操作。