大鼠尿道上皮细胞分离自尿道管组织;尿道是从膀胱通向体外的管道。尿道上皮细胞主要功能:①尿道上皮细胞排列在膀胱表面,它是由高可塑性和具有多种功能特殊类型的细胞组成;②上皮细胞组成膀胱的防御系统与病原体接触,它们具有多种防御机制来阻止病原体粘着,保持泌尿器溶解物的不渗透性;③膀胱上皮细胞表达雌激素α、β受体,上皮生长因子受体和纤维母细胞生长因子受体,在损伤和感染时,这些受体对膀胱上皮细胞起着重要作用;④能释放许多细胞因子、免疫系统介质。
产品属性
产品名称 大鼠尿道上皮细胞
组织来源 尿道组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 大鼠尿道上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠尿道上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠尿道上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠尿道上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
外科剪镊、六孔培养板、细胞筛、多聚赖氨酸包被耗材
试剂:无菌 PBS、角质细胞无血清培养基、DispaseⅡ、胰酶
二、取材与预处理
解剖大鼠取出完整尿道组织,剪开尿道管壁,PBS 冲洗管腔分泌物。
修剪尿道外层结缔组织,组织块浸泡 DispaseⅡ4℃消化过夜。
三、细胞分离与消化
剥离表层尿道上皮组织,剪碎后胰酶 37℃消化 15min。
血清终止消化,吹打过筛,离心收集上皮细胞沉淀。
PBS 洗涤 2 次去除消化酶。
四、纯化与接种培养
无血清上皮培养基重悬细胞,接种包被培养板。
24h 首次换液去除漂浮死细胞,2~3d 换液一次。
细胞成片生长后轻柔传代,避免上皮细胞分化凋亡。
