大鼠脑微血管内皮细胞分离自大脑皮质组织；脑微血管内皮细胞是血脑屏障的主要组成成分，它是组成脑微血管腔面单层扁平上皮样细胞，能够限制可溶性物质和细胞等从血液进入大脑，大脑微血管内皮细胞与外周内皮细胞相比具有一些相同特性。它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在脑血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。与外周内皮细胞相同，大脑微血管内皮细胞表面表达细胞粘附分子，调控白细胞进入大脑。由于微血管内皮细胞的器官特异性，内皮细胞通常取源于疾病研究的相关组织。其主要特征如下：①脑微血管内皮细胞存在许多细胞间紧密连接，产生很高的跨内皮阻抗，延迟细胞旁的通量；②脑微血管内皮细胞缺乏内皮细胞的窗孔结构，其液相物质胞饮水平较低；③脑微血管内皮细胞具有不对称定位酶和载体介导转运系统，从而产生“两极分化”的表现型。
产品属性
产品名称 大鼠脑微血管内皮细胞
简称 BMVECs
组织来源 大脑皮质组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）
培养基： 大鼠脑微血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 内皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代；不建议多次传代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠脑微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠脑微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠脑微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
精细显微镊、玻璃匀浆器、400 目 + 800 目双层滤网、明胶包被培养瓶
试剂：预冷 PBS、DMEM/F12 内皮专用培养基、胶原酶 + DNaseⅠ 消化液、BSA 梯度液
二、取材与预处理
取新生大鼠大脑，剔除小脑、脑干与脑膜，仅留大脑皮层。
PBS 漂洗脑组织，剪碎后轻柔玻璃匀浆，破碎大血管保留微血管片段。
三、细胞分离与消化
匀浆组织经双层滤网过滤，截留微血管团块，收集滤网上微血管。
加入胶原酶 DNase 混合消化液 37℃消化 45min，间断吹打。
血清终止消化，BSA 密度梯度离心分离微血管内皮细胞。
四、纯化与接种培养
吸取中间细胞层，PBS 洗涤后接种明胶包被培养瓶。
差速贴壁去除周细胞、成纤维细胞，每 2 天换液。
细胞形成典型铺路石结构后传代，CD31、ZO-1 鉴定血脑屏障内皮纯度。
